Кроличье поликлональное антитело к ацетилированному BRD4 (K332) (SWISS O60885) | Вестерн-блоттинг, ИФА - Детекция ацетилирования BRD4

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация BRD4

• BRD4 (Bromodomain-containing protein 4) — это хроматиновый "читатель", который распознает ацетилированные гистоны, играя центральную роль в эпигенетической памяти и регуляции транскрипции. Он остается ассоциированным с ацетилированным хроматином на протяжении всего клеточного цикла и помогает сохранять архитектуру хроматина для постмитотической транскрипции генов. В интерфазе BRD4 рекрутирует комплекс P-TEFb к промоторам и дистальным энхансерам, облегчая фосфорилирование CTD РНК-полимеразы II и транскрипционную элонгацию. Он также опосредует активацию NF-kappa-B путем связывания с ацетилированным RELA и регулирует p53-зависимую транскрипцию.
  Связанные ссылки: PMID:16109376, PMID:16109377, PMID:19103749, PMID:23086925, PMID:23317504, PMID:23589332, PMID:24360279, PMID:29176719

• Изоформа BRD4 функционирует как хроматиновый изолятор в ответе на повреждение ДНК, рекрутируя конденсин-2 к ацетилированным гистонам, тем самым ограничивая распространение фосфорилирования H2A.X.
  Связанные ссылки: PMID:23728299

• BRD4 локализуется преимущественно в ядре и ассоциируется с ацетилированным хроматином и митотическими хромосомами. Его связывание с хроматином регулируется статусом ацетилирования гистонов, на который влияют такие сигналы, как активация пути JNK.
  Связанные ссылки: PMID:16109376, PMID:21890894, PMID:25593309

• BRD4 экспрессируется повсеместно и подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование по множеству сериновых остатков (например, S470, S484, S488, S492, S494, S498, S499, S503, S601, S1117, S1126, S1201, S1204) и ацетилирование по K1111. Данное антитело специфически детектирует ацетилирование по Lys332 — модификацию, еще не полностью охарактеризованную в UniProt, но созданную на основе пептида-иммуногена.
  Связанные ссылки: PMID:12543779, PMID:18669648, PMID:19608861, PMID:23317504

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический ацетилированный пептид, окружающий Lys332 человеческого BRD4, разработанный для обеспечения специфического распознавания ацетилированной формы. Для Вестерн-блоттинга рассмотрите возможность использования ядерных экстрактов из клеточных линий человека или мыши и валидируйте специфичность с помощью тестов конкурентного связывания пептидов, используя ацетилированный и неацетилированный пептиды.
• Для ИФА ацетилированный пептид может служить иммобилизованным антигеном. Включите соответствующие контроли (неацетилированный пептид, пустые лунки) и оптимизируйте концентрации иммобилизации для достижения наилучшего соотношения сигнал/шум.
• Реактивность антитела может зависеть от уровня ацетилирования, который может варьироваться в зависимости от обработки клеток (например, ингибиторами HDAC). Рассмотрите возможность стимуляции ацетилирования для улучшения детекции.
• Валидируйте работу антитела в вашей конкретной матрице образца; рекомендуемые стартовые диапазоны концентраций следует определять эмпирически.
• Избегайте повторных циклов замораживания-оттаивания; аликвотируйте и храните при -20°C или в соответствии с рекомендациями.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поставок

CamelBio — надежный партнер в области закупки сырья для IVD, предлагающий широкий портфель антител и реагентов для разработки диагностических средств и исследований в области наук о жизни. Это антитело к ацетилированному BRD4-K332 поддерживает исследования в области эпигенетики и регуляции транскрипции и дополняет наш ассортимент валидированных пар антител, оптимизированных моноклональных/поликлональных антител, объемных вспомогательных реагентов и решений для поиска редких мишеней. Мы оптимизируем вашу цепочку поставок от концепции до клиники, обеспечивая надежный доступ к высококачественному сырью для ваших нужд в анализах.