Кроличья поликлональная антитело к ацетил-гистону H3 (K4/K9/K14/K18/K23/K27) (Q16695 / P68431) для Вестерн-блоттинга (WB), ИФА (ELISA)

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация ацетил-гистона H3

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, фундаментальной повторяющейся единицы хроматина. Нуклеосомы оборачивают и уплотняют ДНК, тем самым регулируя доступ к генетическому материалу. Такая динамическая упаковка играет центральную роль в транскрипции, репликации ДНК, репарации и хромосомной стабильности.

Связанные ссылки: UniProt Q16695 / P68431

Посттрансляционные модификации гистонов, в частности ацетилирование специфических N-концевых остатков лизина, являются критической частью «гистонового кода», управляющего структурой и функцией хроматина. Ацетилирование остатков K4, K9, K14, K18, K23 и K27 гистона H3 связано с транскрипционной активацией, так как оно нейтрализует положительный заряд лизинов, ослабляет взаимодействие гистона с ДНК и способствует открытой конформации хроматина. Эти модификации вносятся гистонацетилтрансферазами (HATs) и удаляются гистондеацетилазами (HDACs), а также служат местами закрепления для различных эффекторных белков.

Связанные ссылки: K4 (K5) ацетилирование: PMID:17194708, K9 (K10) ацетилирование: PMID:16185088, PMID:16267050, K14 (K15) ацетилирование: PMID:16185088, PMID:16267050, K18 (K19) ацетилирование: PMID:16267050, PMID:16627869, K23 (K24) ацетилирование: PMID:16267050, PMID:16457588, K27 (K28) ацетилирование: PMID:16627869, PMID:17194708

Гистон H3 преимущественно локализован в ядре, где он ассоциирован с хромосомной ДНК. Канонический вариант H3.1 (P68431) экспрессируется в большинстве соматических клеток, в то время как тканеспецифичный вариант H3.1t (Q16695) ограничен клетками семенников. Предсказанная широкая перекрестная реактивность антитела охватывает оба варианта.

Связанные ссылки: Субклеточная локализация: UniProt Q16695 / P68431, Тканевая специфичность: Q16695

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуногеном представлял собой синтетический ацетилированный пептид, содержащий модификации K4 и K27; антитело может преимущественно распознавать эти эпитопы, но возможно более широкое распознавание сходным образом ацетилированных лизинов. Рекомендуется подтвердить специфичность с использованием мутантных или немодифицированных пептидных контролей.
• Для Вестерн-блоттинга (Western blot) рекомендуются экстрагированные кислотой гистоны или ядерные экстракты для обогащения мишени; ожидаемый размер полосы составляет примерно 15 кДа.
• В ИФА (ELISA) покрытие ацетилированными пептидами или препаратами нативных гистонов может помочь подтвердить реактивность; титруйте антитело и детекционную систему для оптимального соотношения сигнал/шум.
• Гистон H3 высококонсервативен у разных видов; предполагается, что антитело реагирует с широким спектром организмов, но рекомендуется валидация в образцах пользователя.
• Для поддержания стабильности после восстановления аликвотируйте и храните при -20°C или -80°C, избегая повторных циклов замораживания-размораживания.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio предлагает производителям диагностических средств, исследовательским институтам и лабораториям оптимизированный путь к комплексному поставкам сырья для IVD, от валидированных пар антител и оптимизированных поликлональных/моноклональных антител до объемных вспомогательных реагентов и поиска редких мишеней. Кроличье поликлональное антитело к ацетил-гистону H3 (K4/K9/K14/K18/K23/K27) является примером нашего обязательства предоставлять высококачественные инструменты для эпигенетических исследований. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы с уверенностью пройти путь от разработки анализов до клинической практики.