Поликлональное кроличье антитело к ацетилированному гистону H4 (K5) (P62805) – валидировано для WB, IHC-P, ELISA, ChIP

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация гистона H4

• Гистон H4 является основным компонентом нуклеосомы, он отвечает за упаковку и компактизацию ДНК в хроматин. Эта компактизация ограничивает доступность ДНК для регуляторных факторов, поэтому гистон H4 играет центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и поддержании стабильности хромосом. Связанные источники: UniProt P62805

• Белок преимущественно локализуется в ядре и ассоциирован с хромосомами. Было показано, что ацетилированный гистон H4 локализуется в ядре сперматид 11 стадии сперматогенеза. Связанные источники: UniProt P62805

• Гистон H4 подвергается большому количеству посттрансляционных модификаций (ПТМ) на своем N-концевом хвосте, которые вместе формируют "гистонный код". Ацетилирование лизина 5 (мишень данного антитела) является ключевой модификацией, ассоциированной с активными состояниями хроматина. Связанные источники: PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861

• Другие модификации включают метилирование, фосфорилирование и различные ацилирования, которые скоординированно регулируют экспрессию генов и другие процессы, связанные с матричной ДНК. Связанные источники: UniProt P62805

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Дизайн иммуногена: Антитело получено против синтетического пептида, охватывающего аминокислоты 1-100 гистона H4 человека, который включает N-концевой хвост и ацетилированный эпитоп Lys5. Для подтверждения специфичности рекомендуется использовать неацетилированный пептид или мутант (K5A) в качестве негативного контроля.
• Вестерн-блоттинг (WB): Предсказанная молекулярная масса гистона H4 составляет ~11 кДа. Обеспечьте достаточное разделение белков на SDS-PAGE гелях с высокой концентрацией акриламида (например, 15-18%) и проверьте интенсивность полосы, нормализованную по общему количеству гистонов в контрольной загрузке (например, гистон H3, общий H4).
• Иммуногистохимия на парафиновых срезах (IHC-P): Из-за высокой компактности хроматина рекомендуется проведение демаскировки антигена; можно протестировать цитратный буфер (pH 6,0) или Трис-ЭДТА буфер (pH 9,0). Паттерны ацетилирования могут варьироваться в зависимости от типа ткани и условий фиксации.
• ИФА (ELISA): Антитело можно использовать для детекции ацетилированных пептидов гистонов или кислотно экстрагированных гистонов, напрямую иммобилизованных на планшете. Оптимизируйте концентрацию покрытия и этапы блокировки для снижения неспецифического фона.
• Иммунопреципитация хроматина (ChIP): Подходит для картирования локусов H4K5ac по всему геному. Время сшивания и условия разрезания хроматина следует подобрать эмпирически для каждого типа образца. Рекомендуется проведение Вестерн-блоттинга после иммунопреципитации для подтверждения обогащения.
• Перекрестная реактивность: Последовательность иммуногена высоко консервативна у человека, мыши и крысы, производитель предсказывает широкую перекрестную реактивность с другими видами. Проведите валидацию для вашего вида интереса с помощью выравнивания последовательностей и предварительных тестов.

CamelBio: ваш единый мост по поиску биологических реагентов

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по поиску и поставке реагентов для производителей ИВД (in vitro диагностики) и научных организаций, предоставляя доступ к сырью, техническим услугам и консалтингу на всех этапах — от идеи до клинических исследований. Данное поликлональное кроличье антитело к ацетилированному гистону H4 (K5) входит в нашу курируемую коллекцию антител к ацетилированным белкам и поддерживает исследования в области эпигенетики и хроматина. Помимо этого продукта мы можем поставить валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, крупные объемы вспомогательных реагентов и найти редкое сырье для ваших задач, чтобы ускорить ваши диагностические и исследовательские процессы. Свяжитесь с нами, чтобы подобрать индивидуальное решение для вашего проекта.