Кроличьи поликлональные антитела к NSP8 SARS-CoV-2 для WB, ELISA - P0DTC2

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функции и локализация S-гликопротеина (Spike)

• S-гликопротеин (S-белок, также известный как E2, пепломерный белок) является основным поверхностным антигеном SARS-CoV-2, необходимым для проникновения вируса в клетки хозяина. Он существует в виде гомотримера и расщепляется на субъединицы S1 (связывание с рецептором) и S2 (слияние с мембраной). Связанные ссылки: PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086

• Субъединица S1 прикрепляется к рецепторам хозяина, в первую очередь к ангиотензинпревращающему ферменту 2 (ACE2), инициируя инфекцию. Связывание вызывает конформационные изменения, приводящие к слиянию мембран либо непосредственно на поверхности клетки, либо после эндоцитоза. Связанные ссылки: PMID:34561887 PMID:32075877 PMID:32221306 PMID:34903715

• Альтернативные рецепторы, такие как нейропилин-1 (NRP1) и NRP2, интегрины или ASGR1, могут опосредовать проникновение вируса независимо от ACE2, что потенциально объясняет вирусный тропизм в обонятельном эпителии с низкой экспрессией ACE2. Связанные ссылки: PMID:33082294 PMID:33082293 PMID:35150743 PMID:34837059

• Расщепление S-белка в сайте S2/S2' клеточными протеазами, включая TMPRSS2 на поверхности клетки или катепсин L в эндосомах, необходимо для активации механизма слияния и высвобождения вирусного генома в цитоплазму. Связанные ссылки: PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616

• Являясь вирусным белком слияния I класса, S2 претерпевает необратимое конформационное изменение из состояния до слияния в структуру «шпильки» после слияния, опосредованное областями гептадных повторов, которые образуют тример шпилек, обеспечивающий слияние мембран. Связанные ссылки: PMID:34561887

• Структурные исследования показывают, что домен ножки (stalk) S-белка содержит гибкие шарниры, обеспечивающие свободу ориентации головки, что может способствовать взаимодействию с рецепторами и уклонению от иммунного ответа. Связанные ссылки: PMID:32817270

• S-белок локализуется на мембране вириона, мембране промежуточного компартмента эндоплазматического ретикулума и аппарата Гольджи хозяина, а также на мембране клетки-хозяина. Он подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая гликозилирование и пальмитоилирование, и является ключевым фактором вирулентности.

• Ключевые функциональные термины включают: прикрепление вируса к клетке-хозяину, слияние вирусной мембраны с мембраной хозяина, белок вирусной оболочки, мембрана клетки-хозяина, ингибирование врожденного иммунного ответа хозяина, суперантиген и вирусное уклонение от иммунитета.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является рекомбинантный слитый белок, соответствующий аминокислотам 1-198 NSP8 SARS-CoV-2 (YP_009742615.1). Для вестерн-блоттинга (WB) рекомендуется использовать соответствующие положительные контроли, такие как лизаты клеток, инфицированных SARS-CoV-2, или рекомбинантный белок NSP8. Рекомендуется оптимизация разведения антител и условий детекции.
• Для ИФА (ELISA) обеспечьте правильное покрытие планшета иммуногеном или соответствующими пептидами, полученными из NSP8. Проверьте анализ с использованием положительных и отрицательных сывороточных контролей. Поликлональная природа антител может обеспечить высокую чувствительность, но может потребовать тщательного титрования для минимизации фонового сигнала.
• Поскольку перекрестная реактивность подтверждена для SARS-CoV-2, антитела могут распознавать NSP8 вариантов SARS-CoV-2, однако рекомендуется тестирование на конкретных вариантах. Если требуется точная реактивность, рассмотрите возможность картирования эпитопов.

CamelBio: ваш универсальный партнер по поиску и поставкам

CamelBio предоставляет комплексное решение по поиску и поставке сырья для IVD, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела к вирусным мишеням, таким как SARS-CoV-2, а также вспомогательные реагенты в больших объемах. Обладая опытом работы от концепции до клинического применения, CamelBio поддерживает производителей диагностических систем в получении редких видов сырья, таких как антитела к неструктурным белкам коронавируса, обеспечивая надежность цепочки поставок для разработки тестов. Наша команда готова помочь вам с индивидуальными запросами или техническими консультациями.