Поликлональное антитело против шиповидного белка S2 SARS-CoV-2 для Вестерн-блоттинга, иммунопреципитации, ELISA - P0DTC2

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация шиповидного гликопротеина (S2 субъединица)

• Шиповидный гликопротеин (S) является вирусным белком слияния I класса и основным поверхностным антигеном SARS-CoV-2. Он опосредует начальное прикрепление к клеткам хозяина посредством связывания рецептор-связывающего домена (RBD) в субъединице S1 с рецептором ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2). Связанные ссылки: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• После связывания с рецептором S-белок протеолитически расщепляется в сайте S2′ протеазами хозяина, такими как трансмембранная сериновая протеаза 2 (TMPRSS2) или катепсин L, что запускает конформационные перестройки в субъединице S2, приводящие к слиянию вирусной оболочки с мембраной клетки хозяина. Связанные ссылки: PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• Вирус также может использовать альтернативные рецепторы входа, включая нейропилин-1 (NRP1) и нейропилин-2 (NRP2), которые высоко экспрессированы в обонятельных эпителиальных клетках и могут объяснять симптомы аносмии; интегрины; и асиалогликопротеиновый рецептор 1 (ASGR1) независимым от ACE2 способом. Связанные ссылки: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• Субклеточная локализация: S-белок присутствует на мембране вириона и транспортируется через мембрану промежуточного компартмента эндоплазматического ретикулума–Гольджи (ERGIC) хозяина; слияние происходит на мембране клетки хозяина или внутри эндосом.
• Посттрансляционные модификации включают обширное N-гликозилирование, дисульфидные связи, пальмитоилирование и расщепление на субъединицы S1 и S2. Ключевые слова из UniProt: вирусный белок оболочки, трансмембранный, гликопротеин, взаимодействие хозяин–вирус, вирусная иммуноэвазия, суперантиген и ингибирование врожденного иммунитета хозяина.
• Стеблевой домен S-белка содержит три гибких шарнира, которые обеспечивают значительную ориентационную свободу рецептор-связывающей "головки", что является критически важной особенностью для уклонения от иммунного ответа и взаимодействия с рецептором. Связанные ссылки: PMID:32817270

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический пептид, охватывающий аминокислоты 1174–1273 субъединицы S2 (на основе референсной последовательности YP_009724390.1). Ожидается, что антитело будет распознавать как полноразмерный шиповидный белок (~141 кДа), так и фрагмент расщепления S2.
• Для Вестерн-блоттинга используйте восстанавливающие условия SDS-PAGE. Должна наблюдаться полоса, соответствующая полноразмерному шиповидному белку приблизительно при 141 кДа; также могут появляться низкомолекулярные полосы, представляющие продукты расщепления S2. В невосстанавливающих условиях можно детектировать олигомеры высшего порядка (тримеры).
• Включайте соответствующие положительные контроли, такие как лизаты клеток, инфицированных SARS-CoV-2, или рекомбинантный шиповидный белок. Рекомендуется контроль загрузки (например, GAPDH, β-актин).
• Для иммунопреципитации рассмотрите возможность использования шариков протеина A/G, предварительно конъюгированных с антителом, чтобы минимизировать детекцию полос тяжелых цепей.
• В ELISA это поликлональное антитело может служить в качестве улавливающего или детектирующего реагента в сэндвич-анализах для количественного определения шиповидного белка. Оптимизируйте концентрации для иммобилизации и состав блокирующих буферов для вашего конкретного формата планшета.

CamelBio: Ваш мост к источникам "всё в одном"

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским институтам упрощенный доступ к валидированным сырьевым материалам для IVD. Это антитело против шиповидного белка S2 SARS-CoV-2 является частью нашего растущего портфолио реагентов для исследований COVID-19. Мы также можем дополнительно предоставить подобранные пары антител, моноклональные/поликлональные антитела в больших объемах, вспомогательные белки и материалы для редких мишеней — всё это поддерживается техническими консультациями, чтобы помочь вам в разработке диагностики от концепции до клиники.