Кроличье моноклональное антитело против ZAP70 для Вестерн-блоттинга (WB), ИФ (IF-P), ИФА - P43403

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация ZAP70

• Тирозинпротеинкиназа ZAP-70 (ассоциированный с дзета-цепью белок 70 кДа, родственная Syk тирозинкиназа) кодируется геном ZAP70 и существует в виде альтернативно сплайсированных изоформ.
• Функционирует как важнейшая сигнальная киназа в адаптивном иммунном ответе: регулирует активацию, пролиферацию, дифференцировку, подвижность, адгезию Т-клеток и экспрессию цитокинов; также участвует в развитии тимоцитов и активации зрелых В-клеток.
• При стимуляции Т-клеточного рецептора (TCR) ZAP70 рекрутируется к фосфорилированным ITAM-мотивам CD3E и CD3Z на плазматической мембране, где активируется посредством фосфорилирования LCK. Активированный ZAP70 фосфорилирует белки-адапторы LAT и LCP2, инициируя нисходящие сигнальные каскады. Связанные ссылки: PMID:7509083
• Опосредует интернализацию и деградацию комплекса TCR, взаимодействуя с E3 убиквитинлигазой CBL и адапторами SLA/SLA2, модулируя экспрессию поверхностного TCR и длительность сигнализации.
• Субклеточная локализация: цитоплазма и клеточная мембрана; транслокирует на плазматическую мембрану при активации TCR.
• Тканевая специфичность: экспрессируется в Т-клетках, натуральных киллерах (NK), ранних тимоцитах и про-/пре-В-клетках.
• Посттрансляционные модификации: фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование регулируют его активность и стабильность. Содержит SH2-домены и киназный домен. Ключевые слова: 3D-структура, фосфопротеин, конъюгация Ubl, изопептидная связь, вариант заболевания, ТКИД (SCID).

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой рекомбинантный белок слияния, соответствующий аминокислотам 550-619 в пределах C-концевого киназного домена человеческого ZAP70. Для Вестерн-блоттинга ожидается специфическая полоса около 70 кДа в линиях человеческих Т-клеток (например, Jurkat) или в клетках периферической крови мононуклеарных (PBMC).
• Для иммунофлуоресценции (IF-P) требуется пермеабилизация для обнаружения внутриклеточного и ассоциированного с мембраной ZAP70; рассмотрите использование активаторов Т-клеток для усиления сигнала.
• В применениях ИФА (ELISA) проверьте работу антитела с использованием рекомбинантного белка ZAP70 или лизатов клеток из соответствующих образцов Т-клеток; проведите титрацию оптимальным образом.
• Заявленная перекрестная реактивность относится к человеку. При тестировании других видов убедитесь в консервативности последовательности области иммуногена, особенно в киназном домене.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio предоставляет комплексные услуги по закупке сырья для IVD для разработчиков диагностических средств и исследовательских институтов, охватывая профилирование иммунитета, диагностику лимфом и исследования сигнальных путей Т-клеток. Для анализов на мишень ZAP70 мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и закупку сырья для редких мишеней. Наша цепочка поставок полного цикла и технические услуги оптимизируют вашу разработку от концепции до клиники.