Поликлональные кроличьи антитела к XBP1 для WB, IF/ICC, ELISA - P17861

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация XBP1

• XBP1 существует в виде двух основных изоформ: несплайсированная форма (XBP1u) действует как слабый фактор транскрипции и в основном регулирует ответ развернутого белка (UPR) через отрицательную обратную связь, в то время как сплайсированная форма (XBP1s) является мощным активатором транскрипции генов-мишеней UPR. Связанные ссылки: PMID:8657566 PMID:16461360 PMID:11779464 PMID:25239945
• XBP1 является центральным элементом ответа развернутого белка (UPR), связываясь с элементом ответа на стресс ЭПР (ERSE) и элементом UPR (UPRE) для повышения экспрессии шаперонов ЭПР и компонентов, связанных с деградацией в ЭПР. Связанные ссылки: PMID:11779464 PMID:25239945
• Продукция активного XBP1s включает нетипичный цитоплазматический сплайсинг мРНК XBP1 эндорибонуклеазой IRE1α (ERN1) при стрессе ЭПР. Связанные ссылки: PMID:19394296 PMID:21233347 PMID:23529610
• XBP1u обеспечивает отрицательную обратную связь, направляя XBP1s на деградацию протеасомой, предотвращая гиперактивацию UPR. Связанные ссылки: PMID:16461360 PMID:25239945
• XBP1 локализуется в мембране эндоплазматического ретикулума и перемещается в ядро при активации, а также присутствует в цитоплазме.
• В иммунных клетках XBP1 необходим для дифференцировки плазматических клеток и продукции иммуноглобулинов, а также экспрессируется в синовиальной оболочке при ревматоидном артрите. Связанные ссылки: PMID:11460154
• XBP1 способствует прогрессированию рака: сверхэкспрессия при раке молочной железы способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (EMT) и метастазированию посредством регуляции SNAI1. Связанные ссылки: PMID:25280941
• В эндотелиальных клетках XBP1 способствует индуцированному VEGF ангиогенезу и пролиферации, а также регулирует аутофагию посредством активации транскрипции BECN1. Связанные ссылки: PMID:23529610 PMID:23184933 PMID:19416856

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Исходя из дизайна иммуногена (рекомбинантный белок/синтетический пептид, соответствующий а.а. 277–376 человеческого XBP1), антитела могут распознавать как несплайсированную (~29 kDa), так и сплайсированную (~55 kDa) изоформы; рекомендуется валидация с использованием специфических контролей изоформ или индукцией стресса ЭПР (например, тунамицином).
• Для вестерн-блоттинга (WB) с использованием этих поликлональных кроличьих антител разделяйте белки в восстанавливающих условиях и ожидайте полосу около 29 kDa для XBP1u; индукция стресса ЭПР может сместить сигнал на более спрайснированную форму.
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) оптимизируйте фиксацию (например, 4% PFA) и пермеабилизацию (например, 0.1% Triton X-100) для сохранения локализации в ЭПР/ядре; выполните совместное окрашивание маркерами органелл для подтверждения субклеточного распределения.
• Для ELISA рассмотрите возможность использования антител в качестве реагента для захвата или детекции против рекомбинантного белка XBP1 или лизатов клеток; титрование и условия блокировки должны быть оптимизированы для каждого анализа.
• Сообщается о перекрестной реактивности с мышью и крысой; однако гомология последовательностей в области иммуногена должна быть проверена для вашей конкретной экспериментальной модели.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio специализируется на предоставлении производителям диагностических средств, лабораториям и исследовательским институтам широкого спектра сырья для IVD. Для таких мишеней, как XBP1, участвующих в стрессе ЭПР и биологии рака, мы можем поставлять валидированные пары антител, оптимизированные рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты оптом для поддержки ваших диагностических и исследовательских процессов. Наша модель комплексного снабжения также распространяется на закупку сырья для редких мишеней, обеспечивая вас критически важными компонентами для разработки анализов.