Кроличье моноклональное антитело к WNK3 — Q9BYP7

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация WNK3

• WNK3 — серин/треониновая протеинкиназа семейства WNK (With No Lysine, «без лизина»), также обозначаемая как PRKWNK3. Она является ключевым вышестоящим компонентом каскада киназ WNK-SPAK/OSR1.
• WNK3 регулирует электролитный гомеостаз и восстановление клеточного объёма, фосфорилируя и активируя нижестоящие киназы OXSR1/OSR1 и STK39/SPAK в ответ на гиперосмотический стресс. Связанные публикации: PMID:16275911 PMID:16275913 PMID:16501604 PMID:22989884
• В условиях гиперосмотичности WNK3 функционирует как сенсор молекулярной скученности, подвергаясь жидкостно-жидкостному фазовому разделению с образованием безмембранных компартментов, которые концентрируют киназу вместе с её субстратами и тем самым способствуют эффективной передаче сигналов. Связанные публикации: PMID:36318922
• Активированные киназы OXSR1/OSR1 и STK39/SPAK впоследствии фосфорилируют котранспортёры катионов и хлорида: активируют котранспортёры Na-K-Cl (например, SLC12A2/NKCC1) и ингибируют котранспортёры K-Cl (например, SLC12A4/KCC1, SLC12A5/KCC2, SLC12A6/KCC3), которые совместно обеспечивают регуляторное увеличение объёма клетки. Связанные публикации: PMID:16275911 PMID:16275913 PMID:16357011
• WNK3 также фосфорилирует WNK4, потенциально регулируя активность NCC (SLC12A3), и может фосфорилировать NEDD4L. Независимо от своей киназной активности WNK3 может функционировать как каркасный белок, негативно регулируя локализацию на мембране таких каналов, как KCNJ1 и SLC26A9. Связанные публикации: PMID:16357011 PMID:17975670 PMID:20525693 PMID:17673510
• WNK3 усиливает приток кальция, опосредованный TRPV5 и TRPV6, повышая уровень их экспрессии на мембране посредством киназозависимого механизма. Связанные публикации: PMID:18768590
• Белок преимущественно локализуется в цитоплазме.
• WNK3 широко экспрессируется в головном мозге, лёгких, почках, печени и поджелудочной железе взрослых, а также в тканях плода. Изоформа 1 специфична для головного мозга, тогда как изоформа 3 специфична для почек. Мутации в WNK3 связаны с интеллектуальной недостаточностью.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует пептиду C-концевого участка (аминокислоты 1700–1800), нацеливаясь на область, которая может быть хорошо экспонирована и подходить для определения полноразмерного белка.
• Для вестерн-блоттинга рекомендуется использовать гель SDS-PAGE с низким содержанием акриламида (например, 6–8%), чтобы эффективно разделить крупный белок WNK3 массой 198 кДа, а также включить соответствующие маркеры молекулярной массы.
• Перекрёстная реактивность антитела с белками мыши и крысы указывает на консервативный эпитоп; однако рекомендуется провести валидацию на соответствующем виде и типе образца.
• Помимо WB, антитело подходит для IHC-P и ELISA; для каждого применения и типа ткани рекомендуется оптимизировать методы демаскировки антигена и разведения антитела.
• Поскольку передача сигналов WNK3 активируется в условиях гиперосмотического стресса, при оценке активации пути следует рассмотреть предварительную обработку клеток или тканей гиперосмотическими стимулами (например, сахарозой) для усиления выявления фосфорилированных нижестоящих мишеней.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по снабжению

CamelBio обеспечивает производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории надёжным доступом к высококачественному сырью для IVD, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объёмах и поиск редких мишеней. Для исследований WNK3, связанных с электролитным гомеостазом, передачей сигналов киназ и регуляцией клеточного объёма, CamelBio предлагает комплексные решения по закупкам, адаптированные к вашему процессу разработки — от первоначальной оценки осуществимости до масштабного производства.