Поликлональное кроличье антитело к убиквитил-гистону H2A-K119 (P04908/P0C0S8) для Вестерн-блота и ИФА

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация гистона H2A типа 1

Функция гистона H2A

Гистон H2A является основным компонентом нуклеосомы, упаковывая и компактизируя ДНК в хроматин. Эта структурная роль ограничивает доступность ДНК для белков и тем самым центрально регулирует транскрипцию, репарацию ДНК, репликацию ДНК и стабильность хромосом. Доступность ДНК модулируется комплексом пост-трансляционных модификаций (ПТМ), известным как «гистоновый код», а также ремоделированием нуклеосом.

Субклеточная локализация

Гистон H2A локализуется преимущественно в ядре и ассоциирован с хромосомами.

Пост-трансляционные модификации

Гистон H2A подвергается многочисленным ПТМ, включая ацетилирование, фосфорилирование, цитруллирование и убиквитилирование. К основным аннотированным модификациям относятся:

• N-концевое ацетилирование остатка Ser-2.
• Фосфорилирование остатка Ser-2 киназой RPS6KA5.
• Цитруллирование остатка Arg-4.
• По лизину 119, который является мишенью данного антитела, идентифицировано несколько ацилирований: гидроксиизобутирилирование, бета-гидроксибутирилирование, кротонирование и глутарилирование. Аннотация «Ubl конъюгация» в UniProt подтверждает, что на этом сайте также происходит убиквитилирование.

Ссылки на литературу: PMID:11709551, PMID:15823041, PMID:16457589, PMID:15010469, PMID:24681537, PMID:27105115, PMID:21925322, PMID:31542297

Рекомендации по проведению экспериментов и технические советы

• Иммуногеном является синтетический убиквитилированный пептид, соответствующий области K119 человеческого HIST1H2AB (UniProt P04908/P0C0S8). Такая конструкция обеспечивает специфичность к убиквитилированной форме, однако рекомендуется подтвердить специфичность с использованием подходящих контролей (например, сравнение с немодифицированным пептидом или лизатами клеток с модулированным процессом убиквитилирования).
• Для Вестерн-блота (WB) рекомендуется проводить экстракцию гистонов по протоколу кислотной экстракции для обогащения гистоновых белков. Предсказанная молекулярная масса немодифицированного белка составляет примерно 14 кДа; убиквитилирование добавляет ~8,5 кДа, поэтому можно ожидать полосу около 23 кДа.
• Для ИФА можно использовать формат прямого или сендвич-ИФА. Рекомендуется иммобилизовать на планшете убиквитилированный пептид или рекомбинантный убиквитилированный гистон H2A для оценки связывания антитела.
• Учитывая широкую прогнозируемую перекрестную реактивность (человек, мышь, крыса и другие виды), рекомендуется валидировать антитело в вашей конкретной системе перед масштабированием экспериментов.

CamelBio: Ваш единый центр закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностики и исследовательским институтам решение для комплексных закупок сырья для IVD, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела и объемные вспомогательные реагенты. Данное кроличье поликлональное антитело к убиквитил-гистону H2A-K119, нацеленное на ключевой эпигенетический маркер, является примером нашей возможности поставлять редкие модификационно-специфические исследовательские реагенты наряду с комплексным снабжением для исследований в области биологии гистонов и разработок в области хроматина.