Кроличье pAb против TrkB для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q16620

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация TrkB

• Кодируемый геном NTRK2, TrkB (рецептор факторов роста BDNF/NT-3, нейротрофическая тирозинкиназа рецепторного типа 2) является рецепторной тирозинкиназой, которая служит высокоаффинным рецептором для мозгового нейротрофического фактора (BDNF) и нейротрофина-4 (NTF4), а также связывает нейротрофин-3 (NTF3) с меньшим сродством (PubMed:15494731, PubMed:7574684). Альтернативный сплайсинг генерирует несколько изоформ, включая полноразмерную киназно-активную TrkB, усеченную TrkB-T1 и TrkB-T-Shc, связывающую Shc. Связанные ссылки: PMID:15494731 PMID:7574684
• После индуцированной лигандом димеризации и аутофосфорилирования TrkB рекрутирует и активирует нижестоящие эффекторы, такие как SHC1, FRS2, SH2B1, SH2B2 и PLCG1. Это запускает каскад GRB2-Ras-MAPK (нейрональная дифференцировка и рост нейритов), путь PI3K-AKT1 (рост и выживание клеток) и сигнализацию PLCG1-PKC (синаптическая пластичность).
• Через PLCG1 TrkB также активирует NF-kappa-B, способствуя транскрипции генов выживания и подавляя аноикис. Может опосредовать нейротрофин-зависимую кальциевую сигнализацию в глиальных клетках.
• Субклеточная локализация включает клеточную мембрану, мембраны эндосом/ранних эндосом, аксональные и дендритные отростки, перинуклеарную цитоплазму и постсинаптическую плотность.
• В ЦНС TrkB экспрессируется в коре головного мозга, гиппокампе, таламусе, сосудистом сплетении, мозжечке, стволе мозга и спинном мозге. В ПНС обнаруживается в черепных ганглиях, дорсальных корешковых ганглиях и сенсорных нервах. TrkB-T1 также обнаруживается в поджелудочной железе, почках и сердце, в то время как TrkB-T-Shc преимущественно нейрональная.
• Посттрансляционные модификации включают N-гликозилирование, образование дисульфидных связей и лиганд-зависимое тирозинфосфорилирование. Ключевые слова: гликопротеин, фосфопротеин, киназа, трансмембранный, альтернативный сплайсинг.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 32–430 человеческого TrkB, что соответствует внеклеточному домену. Ожидается, что эта область будет распознавать все изоформы, имеющие общую внеклеточную часть.
• Для Вестерн-блоттинга предсказанная молекулярная масса полноразмерного TrkB составляет 92 кДа; однако гликозилирование может привести к смещению полосы в область более высокой кажущейся молекулярной массы. Рекомендуется использовать восстановительный SDS-PAGE и PVDF-мембрану.
• При иммунофлуоресценции/ICC и IHC-P методы извлечения антигена могут повысить детекцию, особенно в тканях, фиксированных формалином и залитых в парафин. Валидируйте антитело на соответствующих положительных контрольных образцах (например, ткань мозга, нейрональные клеточные линии) и включайте контроли без первичного антитела.
• Поскольку это поликлональное антитело, для критических количественных применений следует проверять консистентность от партии к партии. Рассмотрите возможность его использования в качестве улавливающего или детектирующего антитела в ELISA с соответствующей оптимизацией подбора пары.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio поддерживает производителей диагностических средств, лаборатории и исследовательские институты, предлагая комплексный портфель сырья для IVD и технических услуг — от концепции до клиники. Это кроличье pAb против TrkB хорошо подходит для исследований в нейронауках и передачи сигналов нейротрофинами, включая поиск биомаркеров и разработку анализов. Помимо валидированных первичных антител, CamelBio предлагает оптимизированные пары моноклональных/поликлональных антител, вспомогательные реагенты оптом и поиск редких мишеней для оптимизации вашей цепочки поставок.