Кроличья поликлональная антитела к триметилированному гистону H3-K64 (Q16695/P68431) (WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA)

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация гистона H3

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы — фундаментальной повторяющейся единицы хроматина. Нуклеосомы упаковывают и компактизируют ДНК, регулируя её доступность для клеточных машин, необходимых для таких процессов, как транскрипция, репарация ДНК, репликация ДНК и поддержание хромосомной стабильности. Таким образом, гистоны играют центральную роль в организации и функционировании генома. Доступность ДНК динамически контролируется через сложную систему посттрансляционных модификаций (ПТМ) гистонов, часто называемую гистоновым кодом, а также через активность ремоделирования нуклеосом.

Две изоформы представлены в базах Swiss-Prot под номерами Q16695 и P68431. Q16695 (Гистон H3.1t, также известный как H3t или H3.4) является тестикул-специфичным вариантом гистона H3, экспрессируемым преимущественно в клетках яичка, где он, вероятно, участвует в реорганизации хроматина во время сперматогенеза. P68431 (Гистон H3.1) является каноническим репликационно-зависимым гистоном, который широко экспрессируется и откладывается на новосинтезированной ДНК во время S-фазы клеточного цикла. Обе изоформы имеют обширную гомологию последовательностей и подвергаются множеству ПТМ, включая метилирование, ацетилирование, фосфорилирование и другие, которые модулируют структуру и функцию хроматина.

Триметилирование лизина 64 (K64) является специфической эпигенетической меткой на N-концевом участке гистона H3, хотя его точная биологическая роль все еще изучается. Как и другие события метилирования гистонов, предполагается, что оно влияет на экспрессию генов, выступая в качестве сайта связывания для эффекторных белков или изменяя компакцию хроматина.

Связанные источники: UniProt Q16695, UniProt P68431.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Используемый иммуноген представляет собой синтетический триметилированный пептид, соответствующий области лизина 64 гистона H3 (на основе NP_003520.1). Такая конструкция обеспечивает специфическое распознавание триметилированного состояния этого остатка.
• Для вестерн-блоттинга (WB) рекомендуется использовать лизаты цельных клеток образцов человека, мыши, крысы или других позвоночных. Предполагаемая молекулярная масса ~15 кДа должна быть подтверждена в восстанавливающих и денатурирующих условиях.
• Для иммуногистохимии на парафиновых срезах (IHC-P) может потребоваться методы демаскировки эпитопа (например, термическая демаскировка в цитратном буфере). Необходимо валидировать окрашивание на положительных и отрицательных контрольных тканях, учитывая тестикул-специфичную экспрессию изоформы H3.1t.
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) оптимальные условия фиксации и пермеабилизации следует определять эмпирически. Предполагаемая широкая перекрестная реактивность делает эту антителу подходящей для межвидовых сравнительных исследований.
• В ИФА антитела можно использовать для детекции триметилированных пептидов H3-K64 или рекомбинантных белков. Для снижения неспецифического связывания необходимо обеспечить правильные процедуры блокировки и отмывки.

CamelBio: ваш единый центр поставок реагентов

CamelBio — ведущий B2B-поставщик сырья для производителей диагностических систем, предлагающий диагностическим компаниям, лабораториям и научно-исследовательским институтам оптимизированное универсальное решение от концепции до готового продукта. Данная кроличья поликлональная антитела к триметилированному гистону H3-K64 является ценным инструментом для эпигенетических и хроматиновых исследований, облегчая изучение динамики модификаций гистонов. Помимо этого продукта, CamelBio предоставляет полный портфель реагентов, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и индивидуальный поиск редких мишеней. Сотрудничество с CamelBio позволит ускорить разработку ваших диагностических продуктов за счет надежного высококачественного сырья и экспертной поддержки.