Кроличье моноклональное антитело к триметилированному гистону H3-K4 (Q16695/P68431) для ChIP-Seq, CUT&Tag, Вестерн-блоттинга

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация гистона H3

Гистоны — высококонсервативные основные белки, служащие основными компонентами нуклеосом, фундаментальных единиц хроматина. Гистон H3 — один из пяти основных гистоновых белков, участвующих в структуре хроматина эукариотических клеток. Вместе с H2A, H2B и H4 он формирует гистоновый октамер, вокруг которого оборачивается примерно 147 пар оснований ДНК, уплотняя геном и регулируя доступность для транскрипционного аппарата.

Динамика нуклеосом, включая посттрансляционные модификации (ПТМ) гистоновых хвостов, играет ключевую роль в эпигенетической регуляции. Гистон H3 подвергается многочисленным модификациям, таким как метилирование, ацетилирование, фосфорилирование и другие, которые в совокупности составляют «гистоновый код», управляющий структурой хроматина и экспрессией генов.

Среди этих ПТМ триметилирование лизина 4 на гистоне H3 (H3K4me3) является признаком активной транскрипции. Оно преимущественно обнаруживается в промоторах активно транскрибируемых генов и участвует в рекрутинге комплексов ремоделирования хроматина и транскрипционных факторов. Описываемое здесь антитело специфично распознает триметилированную форму H3K4. Эта модификация осуществляется метилтрансферазами, такими как комплексы MLL, и ассоциирована с активацией генов. Связанные ссылки: PMID:16267050 PMID:16457588 PMID:17194708

Гистон H3.1t (кодируемый геном H3-4, аксессен Q16695) является тестис-специфичным вариантом гистона H3.1, экспрессируемым в клетках семенников. Канонический гистон H3.1 (аксессен P68431) экспрессируется в большинстве тканей и кодируется множеством генов. Оба варианта обладают высокой степенью сходства последовательностей и являются основными компонентами нуклеосомы.

Субклеточная локализация исключительно ядерная, ассоциирована с хромосомами.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Данное антитело получено против синтетического пептида, соответствующего триметилированному лизину 4 человеческого гистона H3. Для таких применений, как ChIP-seq, CUT&Tag или иммунофлуоресценция, рекомендуется включать отрицательный контроль с использованием нетриметилированного пептида или изотипического контроля для подтверждения специфичности.
• Предполагается, что антитело обладает широкой перекрестной реактивностью из-за высокой консервативности N-концевого хвоста H3 у разных видов. Однако рекомендуется проводить валидацию в соответствующей экспериментальной системе.
• При Вестерн-блоттинге должен детектироваться полоса около 15 кДа, соответствующая гистону H3. Убедитесь в правильной экстракции гистонов, особенно при анализе состояний метилирования.
• В анализах ChIP оптимальное фрагментирование хроматина и титрование антитела должны определяться эмпирически.
• Для количественных применений, таких как ELISA или дот-блоттинг, рассмотрите возможность использования калибровочной кривой с известными количествами триметилированного пептида.
• Антитело может быть использовано в мультиплексных анализах с другими антителами к гистоновым модификациям для комбинаторного изучения гистонового кода.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

Как комплексный поставщик сырья для IVD, CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским институтам надежный доступ к высококачественным антителам, таким как это кроличье mAb к триметилированному гистону H3-K4. Мы поддерживаем широкий спектр потребностей для эпигенетических исследований и разработки клинических диагностических тестов, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск редких мишеней. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы оптимизировать процесс закупки сырья от открытия до коммерциализации.