Кроличье моноклональное антитело к TriMethyl-Histone H3-K4 (Q16695 / P68431) для эпигенетических исследований, ChIP, WB, ELISA

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая основа: Функция и локализация гистона H3

• Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, он оборачивает и уплотняет ДНК в хроматин, ограничивая доступность для транскрипционного, репаративного и репликационного аппарата. Он играет центральную роль в поддержании стабильности хромосом и регуляции экспрессии генов через сложный набор посттрансляционных модификаций («гистоновый код»). Связанные ссылки: PMID:17194708
• Канонический белок H3.1 (кодируемый множественными генами HIST1H3, SWISS P68431) экспрессируется репликационно-зависимым образом в большинстве типов клеток, в то время как тестис-специфичный вариант H3.1t (HIST3H3, SWISS Q16695) преимущественно экспрессируется в клетках семенников. Оба локализуются в ядре и ассоциированы с хромосомами во время клеточного деления. Связанные ссылки: Gene/Protein specific; see UniProt Q16695/P68431
• Триметилирование по лизину 4 (H3K4me3) — ключевая эпигенетическая метка, ассоциированная с активными промоторами, открытой конформацией хроматина и инициацией транскрипции. Она наносится метилтрансферазами семейства COMPASS и распознается белками-«читателями», которые способствуют активации генов. Связанные ссылки: PMID:16185088
• H3K4me3 сосуществует и взаимодействует с другими модификациями гистонов (например, ацетилированием, фосфорилированием, метилированием по другим остаткам) для тонкой настройки состояний хроматина. Нарушение регуляции этой метки связано с раком, нарушениями развития и иммунной дисфункцией, что делает её важным биомаркером в эпигенетических исследованиях и разработке ИФА-тестов in vitro.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (синтетический триметилированный пептид вокруг K4) был разработан для обеспечения высокой специфичности к модификации H3K4me3. Для подтверждения селективности рассмотрите возможность проведения пептидно-конкурентных анализов или обработки гистоновыми деметилазами (например, LSD1), которые удаляют метильные группы.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) рекомендуются протоколы экстракции гистонов, обогащающие основные ядерные белки. Ожидаемая полоса — ~15 кДа; подтвердите идентичность полосы с использованием положительных контролей H3K4me3.
• При иммунопреципитации хроматина (ChIP) валидируйте обогащение на известных генах-мишенях H3K4me3 (например, промотор GAPDH) с помощью ПЦР в реальном времени. Включите соответствующие IgG-контроли для оценки фона.
• Для иммуногистохимии (IHC‑P) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) условия демаскировки антигена (цитратный буфер pH 6 или EDTA pH 9) могут влиять на окрашивание. Протестируйте ряд разведений на положительных и отрицательных тканях.
• Из-за высокой консервативности последовательности у разных видов ожидается перекрестная реактивность с белками человека, мыши, крысы и других позвоночных. Валидируйте детекцию в вашей конкретной системе образцов перед количественным анализом.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio — ваш комплексный партнер по поставкам сырья для ИФА-тестов in vitro, предлагающий оптимизированный путь от концепции до клиники. Наш портфель включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и специализированные реагенты для редких мишеней для поддержки ваших диагностических и исследовательских процессов. Это кроличье mAb к TriMethyl-Histone H3-K4 является примером нашей коллекции метилированных антител, разработанных для поддержки исследований эпигенетических биомаркеров и разработки анализов на основе ChIP с необходимой вам надежностью и производительностью.