Кроличья поликлональная антитело к триметил-гистону H3-K4 (H3K4me3) – Q16695/P68431 для ChIP-seq и Вестерн-блоттинга

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация гистона H3

Гистон H3 — это основной белок гистона, который вместе с H2A, H2B и H4 собирается в нуклеосому — фундаментальную повторяющуюся единицу хроматина. Нуклеосомы уплотняют ДНК и регулируют ее доступность для клеточного аппарата, играя центральную роль в транскрипции, репликации, репарации и стабильности хромосом. Посттрансляционные модификации гистонов, collectively известные как «гистоновый код», динамически контролируют структуру хроматина и экспрессию генов. Связанные ссылки: UniProt Q16695/P68431

Триметилирование лизина 4 на гистоне H3 (H3K4me3) является маркером активных промотеров генов и тесно связано с инициацией и элонгацией транскрипции. Эта модификация наносится специфическими метилтрансферазами и удаляется деметилазами, выступая в качестве критического эпигенетического регулятора в процессах развития, дифференцировки и заболеваний.

Гистон H3 локализуется в ядре и ассоциирован с хромосомами. Существует несколько вариантов, включая канонический H3.1 (кодируется несколькими генами, представлен как P68431) и специфичный для тестикул H3.1t (Q16695). В то время как H3.1 экспрессируется повсеместно, H3.1t в основном обнаруживается в клетках семенников. Связанные ссылки: UniProt Q16695

N-концевые хвосты гистонов подвергаются множеству модификаций — ацетилированию, метилированию, фосфорилированию и многим другим, — которые создают сложную регуляторную среду. Комплексные исследования картирования каталогизировали эти модификации, подчеркивая сложную комбинаторную природу гистонового кода. Связанные ссылки: PMID:17194708

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блоттинга (WB) и дот-блоттинга (DB) ожидается одна полоса размером около 15 кДа. В качестве положительного контроля рекомендуются лизаты, богатые гистонами (например, кислотные экстракты ядерных белков HeLa), а нагрузка должна быть нормализована к общему H3.
• При иммунопреципитации хроматина (ChIP) и ChIP-seq оптимизируйте условия сшивки и ультразвуковой обработки для конкретного типа клеток. Включите известные локусы, положительные по H3K4me3 (например, промотер GAPDH), и регионы отрицательного контроля для валидации обогащения.
• Для иммуногистохимии на парафиновых срезах (IHC-P) необходим этап демаскировки антигенов (например, цитратный буфер, pH 6.0). Должна наблюдаться преимущественно ядерная окраска, интенсивность сигнала которой отражает транскрипционную активность ткани.
• В ИФА (ELISA) и других анализах в планшетах рассмотрите возможность использования триметилированного пептида H3K4 в качестве положительного контроля и немодифицированного или монометилированного пептида для подтверждения специфичности модификации.
• Как и в случае с любой поликлональной антителом, следует проверять воспроизводимость между партиями путем титрования на заведомо положительных образцах. Перекрестная реактивность с другими видами прогнозируется на основе высокой консервативности последовательности у позвоночных, но рекомендуется валидация в соответствующей образцовой системе.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексный доступ к реагентам для IVD, техническим услугам и консалтингу — охватывая все этапы от концепции до клиники. Это кроличье поликлональное антитело к триметил-гистону H3-K4 является частью нашего обширного портфолио реагентов для эпигенетических исследований. Мы поддерживаем разработку ваших анализов проверенными парами антител, оптимизированными моноклональными и поликлональными антителами, вспомогательными реагентами оптом и поиском редких целевых материалов. Наша глобальная цепочка поставок и команда экспертов готовы помочь обеспечить необходимые компоненты для вашей диагностической рабочей среды, от раннего открытия биомаркеров до регулируемого производства IVD.