Кроличья моноклональная антитела к триметилгистону H3-K27 (Q16695/P68431) для ChIP, CUT&Tag, WB

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация триметилгистона H3 (K27)

Гистон H3 — это основной гистонный белок, который вместе с H2A, H2B и H4 формирует нуклеосому — основную повторяющуюся единицу хроматина. Как основной компонент нуклеосомы, гистон H3 обвивает ДНК, конденсируя ее в хроматин и регулируя доступ к генетической информации. Эта структурная роль критически важна для поддержания стабильности хромосом и контроля ключевых ядерных процессов, включая транскрипцию, репликацию и репарацию ДНК.

Гистон H3 подвергается большому разнообразию посттрансляционных модификаций (ПТМ) на его гибком N-концевом участке, включая метилирование, ацетилирование, фосфорилирование и цитруллинирование. Эти модификации, часто называемые «гистонным кодом», динамически регулируют структуру и функцию хроматина. Специфическая триметилирование лизина 27 (H3K27me3) является хорошо изученным репрессивным маркером, который вводится репресивным комплексом polycomb 2 (PRC2) и связано с сайленсингом генов, инактивацией Х-хромосомы и регуляцией развития.

Вариант H3.1 (UniProt P68431) широко экспрессируется и составляет основную часть гистона H3 в соматических клетках, тогда как H3.1t (H3-4, UniProt Q16695) в основном экспрессируется в тестикулярных клетках. Оба варианта локализуются в ядре и на хромосомах, где участвуют в сборке нуклеосом и организации хроматина.

Связанные источники: UniProt Q16695, UniProt P68431

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Информация об иммуногене: Антитело было получено против синтетического триметилированного пептида, включающего лизин 27 (K27) гистона H3 человека. Такая конструкция обеспечивает специфическое распознавание модификации H3K27me3. Для приложений, требующих различения разных состояний метилирования, подтвердите специфичность с помощью анализов конкурентного связывания с пептидом.
• Вестерн-блоттинг (WB): Предсказанная молекулярная масса гистона H3 составляет примерно 15 кДа. Для оптимального разделения используйте гели с подходящей концентрацией акриламида (например, 15% SDS-ПААГ). Для подтверждения специфичности полос включите положительные и отрицательные контроли (например, клетки, обработанные ингибиторами EZH2 для снижения уровня H3K27me3).
• ChIP и CUT&Tag: Данное антитело подходит для анализов иммунопреципитации хроматина и CUT&Tag для картирования распределения H3K27me3 по всему геному или на специфических локусах. Оптимизируйте концентрацию антитела для каждого количества входящего хроматина и включите соответствующие контрольные пробы с IgG.
• ИФА: Используйте иммунизирующий пептид в качестве положительного контроля для построения стандартных кривых. Учитывайте, что антитело может проявлять перекрестную реактивность с пептидами, содержащими похожие триметилированные мотивы; проведите валидацию в соответствующей системе проб.

CamelBio: ваш универсальный поставщик биологических реагентов

В CamelBio мы понимаем, насколько важна высококачественное сырье для диагностических и исследовательских приложений. Эта кроличья моноклональная антитела к триметилгистону H3-K27 является примером нашей приверженности предоставлению валидированных антител для эпигенетических исследований. Независимо от того, нуждаетесь ли вы в больших объемах вспомогательных реагентов, оптимизированных парах антител для разработки ИВД или помощи в поиске редких мишеней, CamelBio предлагает комплексные решения по поставкам, чтобы ускорить реализацию вашего проекта от идеи до клинических испытаний.