TLR4 Кроличья Поликлональная Антитела для Вестерн-блоттинга, ИФ/ИЦХ, ИФА - O00206

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация TLR4

• Toll-подобный рецептор 4 (TLR4) — это трансмембранный рецептор распознавания паттернов, который распознает патоген-ассоциированные и ассоциированные с повреждением молекулярные паттерны (PAMPs и DAMPs) для инициации врожденных иммунных ответов. Связанные ссылки: PMID:10835634 PMID:15809303 PMID:16622205
• На плазматической мембране TLR4 взаимодействует с LY96 (MD-2) для опосредования врожденного иммунного ответа на бактериальный липополисахарид (ЛПС). Связанные ссылки: PMID:27022195
• TLR4 передает сигнал через MYD88 и TIRAP, что приводит к активации NF-kappa-B и секреции провоспалительных цитокинов, в то время как опосредованная CD14 интернализация запускает MYD88-независимый путь через TICAM1-TBK1-IRF3 для продукции интерферона I типа. Связанные ссылки: PMID:10835634 PMID:21393102 PMID:27022195 PMID:14517278
• В комплексе с TLR6, TLR4 способствует воспалению в моноцитах/макрофагах и запускает индуцированную лигандом интернализацию и передачу сигналов для продукции специфических цитокинов. Связанные ссылки: PMID:23880187
• TLR4 также участвует в независимых от ЛПС воспалительных реакциях, запускаемых свободными жирными кислотами и Ni(2+), и инициирует активацию NLRP3 инфламмасомы. Связанные ссылки: PMID:20711192 PMID:32894580
• На субклеточном уровне TLR4 локализуется на клеточной мембране, в ранних эндосомах и клеточных выростах, таких как ламеллиподии.
• TLR4 высоко экспрессируется в плаценте, селезенке и лейкоцитах периферической крови, а также обнаруживается в моноцитах, макрофагах, дендритных клетках и Т-клетках; также экспрессируется в клетках рака поджелудочной железы. Связанные ссылки: PMID:9237759 PMID:9435236 PMID:27022195 PMID:36232715
• Белок содержит лейцин-богатые повторы, дисульфидную связь и гликозилирован; принадлежит к семейству Toll-подобных рецепторов и является ключевым игроком во врожденном иммунитете и воспалительных реакциях.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 27-228 человеческого TLR4, покрывая внеклеточный лейцин-богатый повторяющийся домен; эта область критически важна для распознавания лиганда и димеризации рецептора.
• Для вестерн-блоттинга (WB) ожидается полоса около 96 кДа; однако гликозилирование и потенциальная димеризация могут приводить к появлению полос с несколько более высокой молекулярной массой. Проверяйте с использованием соответствующих позитивных контролей (например, лизаты клеток THP-1, спленоцитов).
• При иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (ИФ/ИЦХ) TLR4 можно обнаружить на клеточной мембране, в эндосомах и ламеллиподиях. Оптимизируйте условия фиксации и пермеабилизации для вашего типа клеток; рассмотрите возможность совместного окрашивания с маркерами этих компартментов.
• Для ИФА антитело может использоваться для захвата или детекции TLR4; подтвердите эффективность с рекомбинантным белком или клеточными лизатами человеческого или мышиного происхождения.
• Будучи поликлональными антителами, они могут распознавать множество эпитопов, что может повышать чувствительность детекции, но также может приводить к более высокому фону; рекомендуется титрование и оптимизация блокирования.
• Указана перекрестная реактивность с человеческим и мышиным TLR4; проверяйте реактивность в вашей конкретной экспериментальной системе при использовании других видов.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предлагает комплексный портфель сырья для in vitro диагностики, включая валидированные пары антител и оптимизированные поликлональные антитела, такие как эти TLR4 Кроличьи Поликлональные Антитела, поддерживая исследования врожденного иммунитета и воспаления. Наша платформа для комплексных поставок также предоставляет доступ к объемным вспомогательным реагентам и возможность индивидуального поиска сырья для редких мишеней, упрощая разработку ваших диагностических средств от концепции до клиники.