Кроличье поликлональное антитело к симметрично диметилированному гистону H4-R3 (P62805) для вестерн-блоттинга, иммуногистохимии, иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии, ELISA

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация гистона H4

• Гистон H4 — один из коровых гистонов, формирующих нуклеосому, фундаментальную единицу хроматина. Вместе с гистонами H2A, H2B и H3 октамер гистонов оборачивает около 147 п.н. ДНК, уплотняя ее и регулируя доступ к генетическому материалу.
• Такая упаковка необходима для процессов, использующих ДНК как матрицу, включая транскрипцию, репликацию, репарацию и поддержание стабильности хромосом. Динамическая регуляция структуры хроматина управляется посттрансляционными модификациями (ПТМ) гистонов, часто называемыми «гистоновым кодом».
• Гистон H4 в основном локализован в ядре и ассоциирован с хромосомами. Он может быть локализован в ядре при возникновении специфических модификаций, например, ацетилирования во время сперматогенеза.
• H4 подвергается широкому спектру ПТМ, включая ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, цитруллинирование и различные ацилирования. Эти модификации происходят по множеству остатков и регулируют различные последующие события.
• Симметричное диметилирование аргинина 3 (H4R3me2s) катализируется протеиновыми аргинин метилтрансферазами PRMT5 и PRMT7. Эта модификация вовлечена в регуляцию транскрипции и является одной из множества меток, составляющих гистоновый код. Связанные ссылки: UniProt P62805.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Данное антитело получено против синтетического пептида, охватывающего аминокислоты 1-100 гистона H4 человека (NP_003529.1), с симметричным диметилированием по Arg3. Дизайн иммуногена предполагает специфичность к модифицированной форме, но следует оценить перекрестную реактивность с немодифицированной или другими модифицированными формами.
• Для вестерн-блоттинга (WB) предсказанная молекулярная масса гистона H4 составляет ~11 кДа. Рекомендуется использовать ядерные экстракты или препараты, обогащенные гистонами, в качестве положительного контроля. Образцы следует восстанавливать и денатурировать перед нанесением.
• При иммуногистохимии (IHC) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) может потребоваться демаскировка антигена для экспозиции эпитопа, особенно в тканях, фиксированных формалином и залитых в парафин. Протестируйте несколько методов демаскировки.
• Валидируйте специфичность антитела, включая соответствующие контроли, такие как анализ конкурентного связывания пептида или сравнение с клетками, обработанными ингибиторами метилтрансфераз.
• Предполагается, что антитело будет реагировать с широким кругом видов из-за высокой степени консервативности последовательности гистона H4; однако реактивность в вашей конкретной модельной системе следует проверить.
• Оптимизируйте коэффициенты разведения эмпирически для каждого применения; типичные стартовые разведения могут быть адаптированы из существующих протоколов для поликлональных антител к модификациям гистонов.

CamelBio: Ваш универсальный мост к поставкам

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, исследовательским лабораториям и академическим институтам комплексный портфель сырья для ИВД, технических услуг и решений для цепочки поставок. Для эпигенетических исследований наш каталог включает ряд валидированных антител к модификациям гистонов, включая это антитело к симметрично диметилированному гистону H4-R3. Мы поддерживаем ваши проекты поставками реагентов оптом, оптимизированными парами антител и поиском материалов к редким мишеням, помогая ускорить ваши диагностические и исследовательские процессы. Свяжитесь с нашей командой, чтобы обсудить возможности индивидуальных поставок и оптовые цены.