Кроличье поликлональное антитело к симметрично диметилированному гистону H3-R8 (Q16695/P68431) для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИКК, ИФА, ChIP-seq

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация гистона H3.1t / гистона H3.1

Варианты гистона H3 (включая H3.1t, кодируемый геном H3-4/HIST3H3, и H3.1, кодируемый несколькими кластерами генов, такими как H3C1-H3C12) являются основными компонентами нуклеосомы. Нуклеосомы упаковывают и уплотняют ДНК в хроматин, ограничивая доступность ДНК и играя центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и стабильности хромосом.

Связанные ссылки: UniProt P68431

• Эти гистоны подвергаются сложному набору посттрансляционных модификаций (ПТМ), в совокупности называемых "гистоновым кодом", которые регулируют динамику хроматина и экспрессию генов. Среди них симметричное диметилирование аргинина в положении 8 (R8) зрелого гистона H3 (соответствует Arg9 в последовательности UniProt) катализируется протеин-аргинин-метилтрансферазой 5 (PRMT5). Эта модификация связана с репрессией транскрипции и формированием гетерохроматина.

Связанные ссылки: UniProt Q16695

• Гистон H3.1t (UniProt Q16695) является тестис-специфичным вариантом, экспрессирующимся в основном в клетках семенников, в то время как H3.1 (UniProt P68431) представляет собой канонические соматические формы.
• Субклеточная локализация: Оба варианта локализуются в ядре и на хромосомах.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Вестерн-блоттинг (WB): Ожидайте полосу примерно на 15 кДа. Используйте соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, необработанные клетки vs. клетки, обработанные ингибитором PRMT5) для подтверждения специфичности к симметричному диметилированию. Рассмотрите возможность проведения конкурентных анализов с пептидом для валидации связывания антитела с эпитопом R8me2s.
• Иммуногистохимия (IHC-P) и иммунофлуоресценция (IF/ICC): Оптимизируйте этапы фиксации и пермеабилизации, так как доступность эпитопа может различаться. Поскольку гистон H3 является ядерным белком, убедитесь в ядерном характере окрашивания и сравните с окрашиванием на общий гистон H3 или контрастным окрашиванием DAPI.
• ИФА (ELISA): Это антитело можно использовать для прямого или непрямого ИФА для количественного определения уровней симметричного диметилирования. Титруйте концентрацию антитела и включайте соответствующие блокирующие агенты.
• ChIP-seq: Из-за высокой распространенности гистона H3 оптимизируйте сшивание (кросслинкинг) и фрагментацию хроматина. Используйте минимальное количество исходного материала и валидируйте эффективность ChIP с помощью положительных и отрицательных геномных локусов (например, гетерохроматиновые vs. эухроматиновые регионы).
• Общий совет: Всегда включайте контроль с немодифицированным пептидом для различения сигнала, специфичного к модификации.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предлагает производителям диагностических систем, лабораториям и исследовательским институтам оптимизированный путь закупки сырья для ИВД, от концепции до клиники. Это антитело к симметрично диметилированному гистону H3-R8, нацеленное на критическую эпигенетическую метку, является частью нашего обширного портфолио метилированных антител и реагентов для изучения модификаций гистонов. Помимо отдельных антител, мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом, а также помогаем в поиске сырья для редких мишеней, чтобы ускорить разработку ваших ИВД-тестов и исследовательских программ. Сотрудничайте с нами, чтобы упростить вашу цепочку поставок и продвинуть ваши диагностические проекты.