Кроличья поликлональная антитело к симметрично диметилированному гистону H3-R2 (Q16695/P68431) для WB, IHC, IF, ELISA, ChIP-seq

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация гистона H3

Гистон H3 является одним из основных гистоновых белков, который вместе с H2A, H2B и H4 образует коровую частицу нуклеосомы. Нуклеосомы упаковывают ДНК в хроматин, играя центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и поддержании стабильности хромосом. Связанные источники: UniProt Q16695, UniProt P68431

В клетках человека экспрессируются как гистон H3.1 (кодируется несколькими генами, включая H3C1, H3C2 и т.д.), так и H3.1t (кодируется геном H3-4), при этом H3.1t преимущественно обнаруживается в клетках яичка. Связанные источники: UniProt Q16695

Гистоны подвергаются большому количеству посттрансляционных модификаций (ПТМ), включая ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, цитруллинирование и другие, которые в совокупности называют «гистоновым кодом». Эти модификации регулируют структуру хроматина и экспрессию генов. Симметричная диметилирование остатков аргинина катализируется протеинаргининметилтрансферазами, например PRMT5. Известно, например, о симметричной диметилировании аргинина 9 гистона H3 (H3R9me2s). Данное антитело специфически распознает симметрично диметилированный аргинин 2 (H3R2me2s) — модификацию, которая может играть важную роль в эпигенетической регуляции. Связанные источники: UniProt Q16695

Экспериментальные рекомендации и технические подсказки

• Иммуногеном является синтетический симметрично диметилированный пептид, соответствующий области R2, что обеспечивает высокую специфичность к модификации H3R2me2s. При проведении Вестерн-блота обогащение экстракта гистонами из ядра или кислотная экстракция гистонов может улучшить качество детекции.
• Для иммуногистохимии (IHC-P) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) условия демаскировки антигена и пермеабилизации следует оптимизировать индивидуально для каждого типа ткани или клеток.
• В экспериментах ChIP-seq рекомендуется включать контрольные реакции: входная ДНК, контроль с IgG, а также возможно конкурентное ингибирование пептидом для подтверждения специфичности связывания. Для количественной нормализации полезно использовать спайк-ин контроли.
• Методы на основе ELISA можно использовать для количественного определения уровней H3R2me2s в лизатах клеток или очищенных препаратах гистонов; обеспечивайте равномерное нанесение белка и рассмотрите возможность использования пан-H3 антитела для нормализации.
• Перекрестная реактивность зарегистрирована для человека, мыши, крысы и других видов (предсказана широкая спектрность). Тем не менее рекомендуется провести валидацию в вашей конкретной системе образцов.

CamelBio: ваш универсальный поставочный мост

CamelBio предоставляет производителям диагностических тест-систем, лабораториям и научно-исследовательским институтам широкий ассортимент сырья для ИВД, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также объемные поставки вспомогательных реагентов. Для эпигенетических мишеней, таких как симметрично диметилированный гистон H3-R2, CamelBio гарантирует доступ к редким модификационно-специфическим антителам, поддерживая ваши проекты в области биологии хроматина и разработки диагностики. Наша модель универсального снабжения упрощает переход от идеи до клинического применения.