Кроличье моноклональное антитело к симметрично диметилированному гистону H3-R17 (Q16695/P68431) для Вестерн-блоттинга, Дот-блоттинга, ИГХ (П) и ИФА

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация гистона H3

Гистон H3 является основным компонентом нуклеосомы, обеспечивая упаковку и уплотнение ДНК в хроматин. Это уплотнение ограничивает доступность ДНК для клеточного machinery и играет центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и хромосомной стабильности. Доступность ДНК динамически регулируется посттрансляционными модификациями (ПТМ) гистонов, которые в совокупности называются «гистоновым кодом», а также ремоделированием нуклеосом. Связанные ссылки: PMID:19608861, PMID:17194708

H3 локализуется в ядре и ассоциирован с хромосомами. Две основные изоформы человека представлены записями SWISS Q16695 (Гистон H3.1t, специфичный для тестикул) и P68431 (Гистон H3.1, широко экспрессируемый). В то время как H3.1t преимущественно экспрессируется в клетках семенников, канонический H3.1 присутствует в большинстве тканей, что подчеркивает специфичную для изоформы регуляцию функций хроматина. Связанные ссылки: Тканевая специфичность UniProt Q16695

Метилирование аргинина гистонов, включая симметричное диметилирование, является критической ПТМ. Фермент PRMT5 катализирует симметричное диметилирование остатков аргинина, таких как хорошо охарактеризованный сайт R9, влияя на регуляцию транскрипции и организацию хроматина. Симметричное диметилирование по R17 гистона H3, являющееся мишенью этого антитела, представляет собой связанную модификацию в ландшафте метилирования гистонов. Хотя специфические функции симметрично диметилированного R17 изучены в меньшей степени, вероятно, он участвует в активации или подавлении генов в зависимости от геномного контекста. Связанные ссылки: PMID:16267050, PMID:17194708

Многочисленные другие модификации украшают H3, включая ацетилирование, фосфорилирование, цитруллинирование и АДФ-рибозилирование, каждая с собственными ферментативными системами и различными функциональными последствиями. Это антитело предлагает инструмент для исследования точной роли симметричного диметил-R17 в сложном гистоновом коде.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Подтвердите специфичность антитела с помощью пептидных конкурирующих анализов; рассмотрите возможность инкубации антитела как с симметрично диметилированным пептидом R17, так и с немодифицированным аналогом для валидации специфического связывания с модификацией.
• Для Вестерн-блоттинга обогатите фракции ядерных белков для усиления сигнала и проверки ожидаемой полосы ~15 кДа в соответствующих клеточных лизатах (например, HeLa, ткань яичек при использовании изоформы H3.1t).
• В применениях ИГХ (П) оптимизируйте восстановление антигена (например, цитратный буфер pH 6.0 или EDTA pH 9.0) и включите отрицательные контроли (изотип кроличьего IgG), чтобы обеспечить специфичность окрашивания.
• Обнаружение на основе ИФА можно проводить с использованием модифицированных и немодифицированных пептидов в качестве покрывающих антигенов; проверьте линейность и чувствительность в соответствующем диапазоне концентраций.
• Перекрестная реактивность прогнозируется для широкого спектра видов; всегда проводите валидацию в конкретной интересующей системе образцов, чтобы обеспечить ожидаемое распознавание эндогенного симметрично диметилированного H3-R17.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio — это комплексный партнер по сырью для IVD, обслуживающий производителей диагностических средств, лаборатории и научно-исследовательские институты от концепции до клиники. Это кроличье моноклональное антитело к симметрично диметилированному гистону H3-R17 поддерживает передовые эпигенетические исследования и исследования биологии хроматина. Наш портфель включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реактивы оптом и поиск редких мишеней, обеспечивая надежный доступ к специализированным реагентам, необходимым для ускорения вашей работы.