Моноклональное кроличье антитело Smac/Diablo для WB, IF/ICC, ELISA — Q9NR28

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация Smac/Diablo

• Diablo (белок, непосредственно связывающийся с IAP и имеющий низкую изоэлектрическую точку), также известный как активатор каспаз, происходящий из межмембранного пространства митохондрий (Second mitochondria-derived activator of caspases, SMAC), представляет собой проапоптотический белок, который способствует апоптозу, активируя каспазы в пути цитохром c/Apaf-1/каспаза-9.
• Он действует, противостоя ингибирующей активности белков-ингибиторов апоптоза (IAP), в частности подавляя связывание BIRC6/BRUCE с каспазами. Связанные публикации: PMID:15200957 PMID:36758104 PMID:36758105
• Diablo снижает стабильность и антиапоптотическую активность XIAP/BIRC4, способствуя его убиквитинированию и протеасомной деградации, а также нарушает взаимодействие XIAP с процессированной каспазой-9, активируя каспазу-3.
• Белок локализуется в митохондриях и высвобождается в цитозоль в ответ на апоптотические стимулы.
• Он экспрессируется повсеместно, при этом самые высокие уровни наблюдаются в семенниках; также высокая экспрессия отмечается в сердце, печени, почках, селезёнке, предстательной железе и яичниках; более низкая — в головном мозге, лёгких, тимусе и лейкоцитах периферической крови.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ, а мутации в этом гене связаны с несиндромальной тугоухостью (DFNA64).
• Посттрансляционные модификации включают конъюгацию с убиквитином; белок содержит транзитный пептид для адресации в митохондрии.

Рекомендации по экспериментам и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 56–239 зрелого человеческого Smac/Diablo и охватывает функциональную область после процессинга в митохондриях; он подходит для выявления эндогенного зрелого белка (обработанная форма размером около 23 кДа) и, возможно, полноразмерного предшественника.
• Для вестерн-блоттинга (WB) рекомендуется использовать лизаты митохондрий или цельных клеток; расчётная молекулярная масса полноразмерного предшественника составляет 27 кДа, тогда как зрелая форма после отщепления транзитного пептида мигрирует примерно на уровне 23 кДа. Оптимизируйте условия лизиса и загрузки образца соответствующим образом.
• При проведении иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC) в стабильных условиях может наблюдаться митохондриальная локализация; после индукции апоптоза окрашивание может смещаться в цитозоль.
• Для ELISA антитело можно использовать для захвата или выявления рекомбинантного либо эндогенного Smac/Diablo; для оптимальной чувствительности рекомендуется использовать в паре с антителом для детекции, направленным против неперекрывающегося эпитопа.
• Указана перекрёстная реактивность с мышью и крысой; при работе с этими видами валидируйте антитело в соответствующей ткани или клеточной системе для подтверждения реактивности и специфичности.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по поиску поставщиков

CamelBio — ваш универсальный партнёр по поиску сырья для IVD, предоставляющий исследователям и производителям валидированные моноклональные антитела, такие как это кроличье мАТ Smac/Diablo, для исследований апоптоза и рака. Мы предлагаем комплексные решения по поставкам, включая оптимизированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и помощь в поиске сырья для редких мишеней, чтобы ускорить разработку диагностических продуктов. Сотрудничайте с нами, чтобы упростить закупки на всех этапах — от концепции до клинического применения.