Кроличья моноклональная антитело к шиповидному белку S1 SARS-CoV-2 для ВБ, ИФ/ИКК, ИФА — P0DTC2

Основные спецификации и параметры продукта

Биологические основы: функция и локализация шиповидного белка S1 SARS-CoV-2

• Шиповидный гликопротеин (S) опосредует проникновение вируса в клетку за счет связывания с рецептором ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2) хозяина, что является ключевым этапом инициации инфекции. Связанные источники: PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• Альтернативные рецепторы, такие как невропилин-1 (NRP1)/NRP2, рецептор азиалогликопротеина 1 (ASGR1) и интегрины, также могут способствовать проникновению вируса, что может обуславливать тропизм к обонятельным эпителиальным клеткам с низким уровнем экспрессии ACE2. Связанные источники: PMID:33082294 PMID:33082293 PMID:35150743 PMID:34837059
• S-белок расщепляется протеазами хозяина на субъединицы S1 (связывающаяся с рецептором) и S2 (обеспечивающая слияние с мембраной); расщепление в сайте S2' ферментами TMPRSS2 или катепсином L является необходимым условием активации слияния. Связанные источники: PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616 PMID:34561887
• После расщепления субъединица S2 претерпевает значительную конформационную перестройку: из преслиянического состояния переходит в постслиянический тримерный шпиль, приближая вирусную и клеточную мембраны друг к другу для слияния.
• В клетке шиповидный белок локализуется на мембране вириона, мембране промежуточного компартмента эндоплазматической сети – аппарата Гольджи (ERGIC) хозяина и клеточной мембране хозяина, что отражает цикл его транспортировки и почкования.
• S-белок обладает свойствами, сходными со сверхантигенами, участвует в иммуноэвазии вируса, ингибирует врожденные иммунные ответы хозяина и противодействует рестрикционным факторам, таким как тетерин.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Дизайн иммуногена: антитело получено против синтетического пептида, охватывающего аминокислоты 200–300 в составе субъединицы S1 (YP_009724390.1), область перекрывающая домен связывания с рецептором. Этот эпитоп консервативен у многих изолятов SARS-CoV-2, что предполагает широкую реактивность.
• Для Вестерн-блота (ВБ) полноразмерный шиповидный белок имеет предсказанную молекулярную массу ~141 кДа; однако, в зависимости от препаратации образца, может наблюдаться детекция продуктов расщепления S1 (около 80 кДа). Рекомендуется проводить валидацию с использованием лизатов клеток, инфицированных SARS-CoV-2, или рекомбинантного белка S1.
• При иммунофлуоресценции (ИФ/ИКК) для детекции внутриклеточного шиповидного белка в инфицированных клетках рекомендуется использовать протоколы пермеабилизации. Кокрашивание с органельными маркерами может помочь в изучении субклеточной локализации.
• Для применения в ИФА антитело можно использовать в качестве реагента захвата или детекции для количественного определения рекомбинантного белка S1 или вирусных частиц. Титр и перекрестная реактивность должны быть подтверждены для релевантных вариантов SARS-CoV-2.
• Как и для всех исследовательских антител, оптимальные рабочие разведения должны определяться эмпирически для каждого анализа и типа образца.

CamelBio: ваш универсальный партнер по поиску материалов

CamelBio — это специализированный универсальный партнер по поиску сырья для ИВД, предоставляющий исследователям и производителям диагностических систем антитела высокого качества, вспомогательные реагенты и услуги индивидуальной закупки. Мы предлагаем валидированные моноклональные и поликлональные антитела, подобранные пары и реагенты в больших объемах, чтобы ускорить исследования SARS-CoV-2, разработку терапевтических средств и дизайн диагностических тест-систем. Независимо от того, нужны ли вам готовые запасы антител или помощь в поиске редких мишеней, наша интегрированная цепочка поставок поддерживает ваш проект от концепции до клинических исследований.