Кроличье моноклональное антитело к RBD шипа SARS-CoV-2 (N501Y) для Вестерн-блоттинга и ИФА — P0DTC2

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация RBD шипа SARS-CoV-2 (N501Y)

• Шипный гликопротеин (S) SARS-CoV-2 представляет собой тримерный фузионный белок класса I, который опосредует прикрепление вируса и проникновение в клетки хозяина за счет взаимодействия с рецептором ангиотензинпревращающего фермента 2 (ACE2). Связанные источники: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Синтезируется в виде предшественника и расщепляется на субъединицы S1 и S2; субъединица S1 содержит рецептор-связывающий домен (RBD), который взаимодействует с ACE2, тогда как субъединица S2 опосредует слияние мембран.
• Расщепление субъединицы S2 по сайту S2’ клеточными протеазами хозяина TMPRSS2 (на поверхности клетки) или катепсином L (в эндосомах) открывает фузионный пептид и запускает необратимые конформационные изменения, необходимые для проникновения вируса. Связанные источники: PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• Шипный белок может использовать альтернативные рецепторы для проникновения, включая нейропилин-1 (NRP1) и NRP2, интегрины и азиалогликопротеиновый рецептор 1 (ASGR1), что потенциально влияет на тканевый тропизм. Связанные источники: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• Структурно стеблевой домен белка S содержит три шарнира, которые обеспечивают значительную ориентационную свободу головного домена — эта особенность важна для взаимодействия с рецептором. Связанные источники: PMID:32817270
• Белок интенсивно гликозилирован и содержит несколько дисульфидных связей; в цитоплазматическом хвосте имеется сайт пальмитоилирования. Шипный белок локализован на мембране вириона, мембране промежуточного компартмента ЭПР-Гольджи хозяина и мембране клетки хозяина.
• Ключевые темы также включают: иммуноувертка вируса, ингибирование врожденного иммунного ответа хозяина и суперантигенная активность, что указывает на роли шипного белка за пределами проникновения в клетку.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Данное антитело получено против синтетического пептида, охватывающего аминокислоты 450–550 RBD шипа SARS-CoV-2 (мутант N501Y), поэтому оно, вероятно, распознает эпитоп в этой области; при необходимости данных по перекрестной реактивности подтвердите специфичность по отношению к дикому типу и другим вариантам.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) используйте восстанавливающие условия и рассмотрите дегликозилирование, чтобы улучшить детекцию полноразмерного шипного белка с массой ~141 кДа; для валидации используйте рекомбинантный RBD или тример шипа в качестве положительного контроля.
• В процедурах ИФА это моноклональное антитело можно использовать как захватывающий или детектирующий реагент; в соответствующей матрице образца необходимо оптимизировать достаточную концентрацию для покрытия и условия блокировки.
• Из-за критической роли RBD в прикреплении к клеткам хозяина это антитело может быть полезно для исследований нейтрализации или конкурентных анализов связывания, но такие варианты применения требуют независимой функциональной валидации.

CamelBio: ваш универсальный партнер по закупкам

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по поставкам реагентов для производителей ИВД и научных исследователей, предоставляя высококачественные антитела, антигены и вспомогательные реагенты для исследований инфекционных заболеваний и разработки диагностики. для изучения SARS-CoV-2 мы предлагаем курированный портфель валидированных антительных пар, моноклональных антител и рекомбинантных белков, чтобы ускорить разработку тест-систем. Свяжитесь с нашей командой для получения индивидуальных решений по поставкам и технической поддержки, адаптированных под потребности вашего проекта.