Моноклональное антитело кролика против мышиного IgM, меченное , для проточной цитометрии — P01872

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация константной области тяжелой цепи Ig (му)

• Иммуноглобулиновая тяжелая константная область му (константная область тяжелой цепи IgM) кодируется геном Ighm (Igh-6) и составляет константную часть антител класса IgM.
• Связанный с мембраной IgM (mIgM) является основным компонентом комплекса В-клеточного рецептора (BCR), обеспечивает конститутивный тонический сигнал, необходимый для выживания В-клеток, и опосредует сигнализацию через пре-BCR, которая регулирует селекцию В-клеток и аллельную эксклюзию.
• Секретируемый IgM (sIgM) образует мультимеры преимущественно в виде пентамеров (иногда гексамеров), что обеспечивает высокую авидность при распознавании антигена. Естественные sIgM полиреактивны и связывают как собственные структуры организма, так и патогены, в то время как иммунные sIgM являются антигенспецифичными; оба вида необходимы для эффективного гуморального иммунного ответа. Связанные источники: PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• sIgM опосредует эффекторные функции в основном через Fc-рецепторы (например, FCMR на лимфоидных клетках) и систему комплемента. Он связывает C1q, запуская классический путь активации комплемента, и совместно с C1q и манноз-связывающим лектином способствует фагоцитозу апоптотических клеток макрофагами, помогая удалять аутоиммуногенные эпитопы. Связанные источники: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• При мукозальном иммунитете sIgM транспортируется через слизистый эпителий с помощью полииммуноглобулинового рецептора (PIGR) для сканирования поверхности слизистых оболочек. Комплексы IgM с антигеном могут подвергаться опосредованной FCMR ретротранзитозе через М-клетки к антигенпрезентирующим клеткам в мукозальных лимфоидных тканях. Связанные источники: PMID:34788614
• Субклеточная локализация: секретируемая форма выделяется во внеклеточное пространство; связанная с мембраной форма располагается в клеточной мембране и имеет один трансмембранный домен.
• Тканевая специфичность: экспрессируется в костном мозге, а также в В-1 и В-2 клетках (на уровне белка).
• Посттрансляционные модификации включают образование дисульфидных связей и гликозилирование, которые критически важны для правильной укладки и мультимеризации белка.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген включает аминокислоты 105–454 константной области мышиного IgM, поэтому ожидается, что антитело распознает константный домен всех подклассов мышиного IgM независимо от специфичности вариабельной области.
• Для проточной цитометрии рекомендуется титровать антитело на мышиных спленоцитах или В-клеточных линиях для определения оптимальной концентрации при окрашивании. Для подтверждения специфичности рекомендуется проводить ко-окрашивание с пана-В-клеточным маркером (например, анти-CD19).
• Флуорофор относится к красителям дальнего красного диапазона (длина волны возбуждения ~650 нм, эмиссии ~668 нм). Убедитесь, что вашего цитометра оборудована соответствующим красным лазером (например, 633 нм или 640 нм).
• При внутриклеточном окрашивании оптимизируйте условия фиксации и пермеабилизации, поскольку эпитоп расположен в константной области и обычно сохраняется после обработки детергентами.
• Обязательно используйте контроль изотипа (моноклональное антитело кролика, меченное тем же флуорофором) для учета неспецифического связывания.

CamelBio: ваш единый центр поиска и поставки реагентов

CamelBio работает с производителями диагностических систем, научными лабораториями и исследовательскими институтами как универсальный поставщик сырья для производства ИВД тестов. Для таких мишеней, как мышиный IgM, участвующих в гуморальном иммунитете и биологии В-клеток, мы предоставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, крупные партии вспомогательных реагентов и индивидуальный поиск сырья для редких мишеней. Сотрудничество с нами позволяет ускорить разработку вашего теста от идеи до клинических испытаний.