кроличье анти-мышиное моноклональное антитело к CD68 для IF/ICC и FC — P31996

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация CD68

• CD68, также известный как макросиалин, Lamp4, gp110 или Scard1, представляет собой сильно гликозилированный трансмембранный белок, относящийся к семейству лизосомных/эндосомных мембранных гликопротеинов (LAMP).
• Он преимущественно экспрессируется в тканевых макрофагах и в меньшей степени — в дендритных клетках, являясь классическим маркером этих типов фагоцитирующих клеток.
• CD68 участвует в фагоцитарной активности, включаясь во внутриклеточный лизосомный метаболизм и опосредуя внеклеточные взаимодействия клетка–клетка и клетка–патоген.
• Белок связывается с ткане- и органоспецифичными лектинами или селектинами, способствуя направленной миграции субпопуляций макрофагов в определённые участки организма.
• CD68 быстро перераспределяется между эндосомами, лизосомами и плазматической мембраной; этот процесс может обеспечивать перемещение макрофагов по субстратам, несущим селектины, или по другим клеткам.
• На субклеточном уровне CD68 локализуется в мембранах эндосом, мембранах лизосом и клеточной мембране, что соответствует его динамическому транспорту и функциональным ролям.
• Белок содержит сигнальный пептид, крупный люминальный/внеклеточный домен с муциноподобными повторами, одну трансмембранную спираль и короткий цитоплазматический хвост; для него также характерны альтернативный сплайсинг и образование дисульфидных связей.

Рекомендации по экспериментам и технические советы

• Для иммунофлуоресценции (IF/ICC) рекомендуется включить этап пермеабилизации (например, с использованием Triton X-100 или сапонина) для выявления внутриклеточных пулов CD68 в лизосомах/эндосомах, поскольку белок локализуется в этих компартментах.
• Для проточной цитометрии (FC) протестируйте протоколы с живыми и фиксированными/пермеабилизированными клетками, чтобы выявить CD68, локализованный на поверхности, и его общее содержание. Проведите титрование антитела для определения оптимальной концентрации окрашивания для конкретного типа клеток и экспериментальных условий.
• Используйте соответствующие изотипические контроли и контроли FMO (fluorescence minus one, «все флуорохромы, кроме одного») для подтверждения специфичности окрашивания, особенно при анализе популяций макрофагов и дендритных клеток.
• Поскольку иммуноген охватывает аминокислоты 21–291 CD68 мыши (внеклеточный/люминальный домен), ожидается, что антитело будет распознавать нативный белок как в денатурирующих, так и в нативных условиях; однако эффективность в конкретном применении следует подтвердить в ходе предварительных экспериментов.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по снабжению

CamelBio — стратегический универсальный партнёр по снабжению, предоставляющий производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям высококачественное сырьё для IVD — от валидированных пар антител до вспомогательных реагентов оптом. Это антитело к CD68 мыши предназначено для передовых исследований макрофагов и дендритных клеток; мы обеспечиваем быстрый доступ к оптимизированным моноклональным антителам, поиск редких мишеней и технические консультации для ускорения разработки ваших анализов.