Кроличье моноклональное антитело против мышиного CD45 для IF/ICC, FC - P06800

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация CD45

• CD45, также известный как лейкоцитарный общий антиген (L-CA) и Ly-5, представляет собой рецепторную тирозинфосфатазу, экспрессируемую на поверхности всех ядросодержащих гематопоэтических клеток.
• Он играет критическую роль в активации T-клеток, дефосфорилируя ключевые сигнальные молекулы, такие как SKAP1, FYN и LYN, тем самым модулируя пороги нижележащей сигнализации.
• Благодаря взаимодействию с DPP4, CD45 действует как позитивный регулятор коактивации T-клеток, усиливая сигнализацию от антигенного рецептора.
• В иммунологическом синапсе CD45 взаимодействует с CLEC10A на дендритных клетках, распознавая модифицированный Tn-антигеном CD45 на эффекторных T-клетках для тонкой настройки активации и ограничения аутореактивности.
• Белок содержит два тандемных внутриклеточных фосфатазных домена; первый домен обладает каталитической активностью, а второй влияет на субстратную специфичность.
• Альтернативный сплайсинг генерирует множество изоформ, включая B220 (CD45R), которые дифференцированно экспрессируются среди субпопуляций лейкоцитов, обеспечивая разнообразную функциональную регуляцию.
• CD45 локализуется в клеточной мембране, мембранных рафтах и иммунологическом синапсе, что согласуется с его ролью в инициации сигнала и модуляции корецепторов.
• Обширные посттрансляционные модификации, включая N-гликозилирование и фосфорилирование, регулируют его стабильность, связывание лигандов и фосфатазную активность.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Данное антитело получено против рекомбинантного белка, охватывающего аминокислоты 26–566 мышиного CD45, что включает весь внеклеточный домен. Ожидается, что оно распознает внеклеточный эпитоп, что делает его пригодным для окрашивания живых клеток в проточной цитометрии без пермеабилизации.
• Для иммунофлуоресценции можно использовать стандартную фиксацию (например, 4% PFA) и опциональную пермеабилизацию. Следует наблюдать мембранное окрашивание из-за трансмембранной топологии CD45.
• Будучи прямой конъюгацией , вторичное антитело не требуется. Оптимальные титры следует определять эмпирически для каждой экспериментальной системы для достижения специфического окрашивания с минимальным фоном.
• Учитывая высокую экспрессию CD45 на лейкоцитах, это антитело идеально подходит для идентификации и гейтинга популяций иммунных клеток в проточной цитометрии. Включайте соответствующие контроли изотипа и FMO (fluorescence-minus-one).

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio поддерживает разработчиков диагностики и лаборатории, предоставляя интегрированные поставки сырья для IVD, включая валидированные пары антител, моноклональные и поликлональные антитела, объемные вспомогательные реагенты, а также индивидуальный поиск редких мишеней. Это конъюгированное с анти-CD45 моноклональное антитело способствует профилированию лейкоцитов и исследованиям активации T-клеток в мышиных модельных системах. Свяжитесь с нами, чтобы узнать, как наша платформа комплексных закупок может оптимизировать разработку ваших анализов от концепции до клинического применения.