Моноклональное антитело кролика против человеческого/обезьяньего CD4 для проточной цитометрии – P01730

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация CD4

• CD4 – это трансмембранный гликопротеин I типа с молекулярной массой 51 кДа, относящийся к суперсемейству иммуноглобулинов. Он экспрессируется на поверхности Т-хелперов, макрофагов, дендритных и NK-клеток и является маркером вспомогательных Т-лимфоцитов.
• В качестве корецептора CD4 связывается с молекулами MHC класса II на антигенпрезентирующих клетках, одновременно взаимодействуя с Т-клеточным рецептором (TCR) для рекрутинг киназы Src LCK, которая инициирует сигнальные каскады, приводящие к активации Т-клеток, продукции цитокинов и дифференцировке.
• В тимусе CD4 участвует в положительной селекции и определении линейной принадлежности CD4+ Т-хелперов, что необходимо для развития адаптивного иммунитета.
• CD4 является основным рецептором для ВИЧ-1, опосредуя проникновение вируса в клетки-хозяева; впоследствии он даунрегулируется акцессорным белком ВИЧ-1 Vpu для способствования иммунному уклонению вируса. Связанные источники: PMID:12089508, PMID:16331979, PMID:2214026, PMID:17346169
• CD4 также действует как клеточный рецептор для проникновения человеческого герпесвируса 7 (ВГВ-7). Связанные источники: PMID:7909607
• Пост-трансляционные модификации включают N-связанную гликозилирование, образование дисульфидных связей во внеклеточных Ig-подобных доменах и пальмитоилирование по цистеиновому остатку в цитоплазматической части, которые модулируют мембранную локализацию и сигналинг.
• Белок локализуется преимущественно на плазматической мембране через один проходной трансмембранный альфа-спираль, его внеклеточная область организована в четыре иммуноглобулиноподобных домена (D1–D4), критических для взаимодействия с лигандами.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген, использованный для получения этого антитела, представляет собой рекомбинантный человеческий белок CD4, поэтому антитело распознает нативные эпитопы, зависящие от конформации, и подходит для поверхностного окрашивания при проточной цитометрии.
• Для применения в проточной цитометрии титруйте антитело с использованием мононуклеаров периферической крови человека или макаки-крабоеда (PBMC) для определения оптимальной концентрации. Используйте соответствующие изотипные контроли и при необходимости проводите блокировку Fc-рецепторов.
• Можно рассмотреть окрашивание цельной крови или суспензии единичных клеток лимфоидной ткани с последующим проведением стандартных протоколов с использованием подходящих антикоагулянтов и красителей для оценки жизнеспособности.
• Шаги фиксации и пермеабилизации следует валидировать, так как они могут изменить доступность эпитопа; для внутриклеточного окрашивания используйте протоколы, оптимизированные для мембранных антигенов.
• Убедитесь, что настройки компенсации прибора правильно откалиброваны для флуорофора , чтобы избежать спектрального перекрытия, особенно в многоцветных панелях.

CamelBio: ваш единый центр по поиску сырья

CamelBio предоставляет производителям диагностических продуктов и исследовательским лабораториям комплексное решение для поставок сырья для ИВД, включая валидированные пары антител, объемные партии моноклональных/поликлональных антител и вспомогательные реагенты. Данное антитело против CD4 подходит для иммунофенотипирования и иммунного мониторинга, а наша платформа поиска также может поставлять сырье для редких мишеней и предоставлять комплексную техническую поддержку, адаптированную под ваши задачи разработки. От идеи до клиники CamelBio связывает этап открытия и коммерциализации диагностических продуктов.