Кроличье моноклональное антитело к CD14 человека/макаки для проточной цитометрии — P08571

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функции и локализация CD14

• CD14 — специфичный для миелоидных клеток гликопротеин, богатый лейцином, также известный как антиген дифференцировки моноцитов CD14 или антиген My23.
• CD14 функционирует как ключевой корецептор бактериального липополисахарида (LPS), опосредуя распознавание и ответ врождённого иммунитета. Связанные публикации: PMID:1698311, PMID:23264655
• Совместно с LBP CD14 связывает мономерный LPS и доставляет его к комплексу LY96/TLR4, тем самым активируя NF-kappa-B и секрецию провоспалительных цитокинов посредством путей, зависимых от MyD88, TIRAP и TRAF6. Связанные публикации: PMID:20133493, PMID:22265692, PMID:23264655, PMID:8612135
• Кроме того, CD14 выступает корецептором для гетеродимеров TLR2:TLR6 и TLR2:TLR1, распознавая соответственно диациллированные и триациллированные липопептиды и инициируя передачу сигнала, зависящую от липидных рафтов. Связанные публикации: PMID:16880211
• CD14 также связывает электроотрицательный LDL (LDL(-)) и опосредует высвобождение цитокинов, индуцированное LDL(-), что указывает на его участие в воспалении, связанном с атеросклерозом. Связанные публикации: PMID:23880187
• На уровне белка CD14 интенсивно выявляется на поверхности моноцитов и слабо — на гранулоцитах; он также экспрессируется большинством тканевых макрофагов. Связанные публикации: PMID:1698311
• На субклеточном уровне CD14 расположен на клеточной мембране, обогащён в мембранных рафтах, а также обнаруживается в аппарате Гольджи; существует и секретируемая форма.
• Белок представляет собой гликопротеин, связанный с GPI-якорем, с многочисленными лейцин-богатыми повторами и дисульфидными связями; эти особенности критически важны для его функционирования.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для окрашивания методом проточной цитометрии проведите титрование антитела, конъюгированного с , с использованием мононуклеарных клеток периферической крови человека (PBMC) или лейкоцитов макаки-крабоеда, чтобы определить оптимальное разведение.
• Поскольку CD14 является мембранным белком, связанным с GPI-якорем, используйте протокол окрашивания поверхности клеток; избегайте пермеабилизации, если не планируется внутриклеточное окрашивание, поскольку это может нарушить комплексы, локализованные в рафтах.
• Рассмотрите возможность совместного окрашивания маркеров моноцитов/макрофагов (например, CD16, CD163) и красителей жизнеспособности для точного выделения популяций моноцитов.
• Если вы переходите к исследованиям на приматах, не относящихся к человеку, проверьте перекрёстную реактивность на образцах макаки-крабоеда; заявленная реактивность антитела с макакой-крабоедом позволяет проводить трансляционные исследования.
• Поскольку CD14 может высвобождаться в растворимой форме, избегайте чрезмерного количества этапов отмывки, которые могут удалить слабо связанное антитело; для окрашивания используйте буфер с 0,5% BSA/PBS.
• При анализе данных используйте соответствующие контроли компенсации при работе с и применяйте гейтинг по FSC/SSC для идентификации популяций моноцитов/макрофагов.

CamelBio: ваш универсальный источник поставок

CamelBio — ваш специализированный универсальный партнёр по поставкам сырья для IVD, обеспечивающий производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории валидированными парами антител, оптимизированными моноклональными/поликлональными антителами, вспомогательными реагентами в больших объёмах и сырьём для редких мишеней. Наше кроличье моноклональное антитело к CD14 человека/макаки, конъюгированное с , отражает нашу приверженность поддержке исследований врождённого иммунитета и воспаления — от поиска биомаркеров до разработки клинических анализов. Позвольте CamelBio ускорить ваш путь от концепции к клиническому применению благодаря надёжным и высококачественным решениям по поставке сырья.