Моноклональное антитело кролика к человеческому TNF-α для внутриклеточной проточной цитометрии – P01375

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация фактора некроза опухоли

• Фактор некроза опухоли альфа (TNF-α), также известный как кахектин или TNFSF2, является ключевым цитокином суперсемейства TNF и существует как в трансмембранной, так и в растворимой форме. Растворимая форма образуется при протеолитическом расщеплении мембранносвязанного предшественника.
• TNF-α связывается со своими рецепторами TNFRSF1A/TNFR1 и TNFRSF1B/TNFBR, запуская сигнальные пути, которые приводят к апоптозу, выживанию клеток, воспалению и иммунной модуляции. Он является мощным пирогеном, вызывает лихорадку напрямую или через индукцию IL-1 и участвует в развитии кахексии.
• При ревматоидном артрите TNF-α нарушает функцию регуляторных Т-клеток за счет повышения экспрессии протеинфосфатазы 1 (PP1), которая дефосфорилирует FOXP3 по остатку серина 418, инактивируя тем самым FOXP3 и приводя к функциональной дефекту Treg. Связанные источники: PMID:23396208
• TNF-α выступает медиатором клеточной гибели при противоопухолевых иммунных ответах, что иллюстрируется его ролью совместно со стимулированными БЦЖ нейтрофилами и мимиками DIABLO/SMAC в клетках рака мочевого пузыря. Связанные источники: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• Он стимулирует ангиогенез за счет синергичной индукции продукции VEGF вместе с IL1B и IL6. Связанные источники: PMID:12794819
• TNF-α индуцирует инсулинорезистентность в адипоцитах за счет ингибирования индуцированной инсулином тирозинфосфорилирования IRS1 и поглощения глюкозы, частично через деградацию белка GKAP42, а также стимулирует остеокластогенез, способствуя резорбции кости.
• В субклеточном масштабе TNF-α локализован на клеточной мембране, на внутриклеточных мембранах и секретируется из клетки. Форма внутриклеточного домена TNF (ICD) дополнительно индуцирует продукцию IL12 в дендритных клетках.
• Посттрансляционные модификации включают образование дисульфидных связей, гликозилирование, миристоилирование и фосфорилирование, которые критически важны для его стабильности и активности.

Экспериментальное руководство и технические рекомендации

• Иммуноген (аминокислоты 77-233) соответствует зрелой растворимой форме TNF-α, лишена N-концевого трансмембранного домена. Такая конструкция может способствовать обнаружению как секретированной, так и внутриклеточной формы предшественника.
• Конъюгат оптимизирован для проточной цитометрии; для внутриклеточного окрашивания рекомендуется использовать протокол фиксации/пермеабилизации, валидированный для цитокинов. Включите соответствующие изотипные контролы и подтвердите специфичность окрашивания на стимулированных и нестимулированных образцах.
• Проводите титрование для определения оптимальной концентрации антитела для вашей конкретной экспериментальной установки, так как показатели окрашивания могут варьироваться в зависимости от типа клеток и их состояния активации.

CamelBio: ваша единая платформа для поиска реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследователям удобный доступ к высококачественным сырьевым материалам для ИВД, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные антитела и вспомогательные реагенты в больших объемах. Для TNF-α и других мишеней-цитокинов мы предоставляем комплексную поддержку снабжения от концепции до клинических исследований, обеспечивая эффективную разработку иммуноанализов и инструментов клеточного анализа. Независимо от того, нуждаетесь ли вы в реагентах к редким мишеням или готовых каталожных продуктах, наша единая платформа удовлетворяет ваши потребности в закупках за счет надежных решений поставок.