Моноклональное антитело кролика против человеческого TNF-α для проточной цитометрии (внутриклеточная) - P01375

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая характеристика: Функция и локализация TNF-α

• Фактор некроза опухоли (TNF-α), также известный как кахектин и TNFSF2, представляет собой цитокин размером 26 кДа, кодируемый геном TNF на хромосоме 6p21.3.

• Основным секретирующим клеткам TNF-α являются макрофаги; он действует как сильный эндогенный пироген, вызывающий лихорадку как напрямую, так и через IL-1, и является ключевым медиатором кахексии при хронических воспалениях и раке.

• Он связывается с TNFRSF1A/TNFR1 и TNFRSF1B/TNFBR, запуская сигнальные каскады, которые регулируют выживание клеток, апоптоз и дифференцировку в широком спектре типов клеток.

• Цитокин синтезируется как трансмембранный белок типа II; его растворимый экстрацеллюлярный домен отщепляется ферментом TACE/ADAM17, что обеспечивает как локальную юкстакринную, так и системную эндокриноподобную активность.

• Посттрансляционные модификации включают гликозилирование, образование дисульфидных связей, миристоилирование и фосфорилирование, которые критически важны для правильной укладки, транспортировки и связывания с рецептором.

• При ревматоидном артрите TNF-α способствует аутоиммунному воспалению, нарушая функцию регуляторных Т-клеток (Treg) через дефосфорилирование, опосредованное PP1, и инактивацию транскрипционного фактора FOXP3 (PubMed:23396208).

  Связанные ссылки: PMID:23396208

• TNF-α способствует противораковому иммунитету, опосредуя нейтрофил-зависимую цитотоксичность против клеток рака мочевого пузыря в комбинации с имитирующими препаратами SMAC (PubMed:16829952, PubMed:22517918).

  Связанные ссылки: PMID:16829952, PMID:22517918

• Он синергично индуцирует продукцию VEGF вместе с IL-1β и IL-6 для стимуляции ангиогенеза (PubMed:12794819) и стимулирует остеокластогенез, приводящий к разрушению кости при воспалительных заболеваниях (По аналогии).

  Связанные ссылки: PMID:12794819

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Поскольку иммуноген охватывает внеклеточный домен (аминокислоты 77-233), ожидается, что антитело распознает как мембранносвязанную, так и растворимую форму TNF-α.
• При проведении внутриклеточной проточной цитометрии обязательно соблюдайте правильные протоколы пермеабилизации и фиксации, чтобы обеспечить доступ антитела к цитоплазматическому TNF-α; рекомендуется использовать известный положительный контроль, например активированные моноциты.
• Проведите валидацию антитела в соответствующей системе образцов; для индукции экспрессии TNF-α при внутриклеточном окрашивании можно использовать цельную человеческую кровь или мононуклеары периферической крови, стимулированные ЛПС.
• Поскольку TNF-α секретируется, во время стимуляции клеток рекомендуется использовать ингибитор транспорта белков (например, брефельдин А или монензин) для накопления внутриклеточного белка.
• Чтобы избежать неспецифического связывания, проводите титрование антитела и используйте соответствующие изотипные контроли.

CamelBio: ваш универсальный поставщик сырья

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и научно-исследовательским институтам универсальный доступ к сырью для ИВД (in vitro диагностики) — от концепции до клинических испытаний. Для исследований, связанных с TNF-α в области иммуноонкологии и воспаления, мы поставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, крупные партии вспомогательных реагентов, а также можем найти редкие мишени для поддержки разработки ваших тест-систем. Свяжитесь с нами, чтобы оптимизировать процесс закупок и ускорить реализацию вашего проекта.