Кроличье моноклональное антитело к человеческому Syk для внутриклеточного проточного цитометрического анализа (FC (intra)) - P43405

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация Syk

• Syk (Селезеночная тирозинкиназа, p72-Syk) — это нерецепторная тирозинкиназа, опосредующая передачу сигнала нижестоящим от различных трансмембранных рецепторов, включая B-клеточный рецептор (BCR), регулируя врожденный и адаптивный иммунитет, клеточную адгезию и активацию тромбоцитов. Связанные ссылки: PMID:12387735, PMID:33782605

• Необходимый для развития B-клеток, Syk требуется для созревания B-клеток на переходе от про-B к пре-B стадии, и при активации BCR фосфорилирует ключевые адапторные белки, такие как BLNK и BTK, инициируя множественные нижестоящие сигнальные каскады. Связанные ссылки: PMID:12456653

• Во врожденном иммунитете Syk активируется рецепторами, такими как CLEC7A, в ответ на грибковые патогены, что приводит к продукции активных форм кислорода (АФК), активации инфламмасомы и транскрипции цитокинов, опосредованной NF-kB.

• Syk также функционирует в неиммунных контекстах, включая интегрин-опосредованную клеточную адгезию, созревание остеокластов, активацию тромбоцитов через коллаген и развитие сосудов. Связанные ссылки: PMID:12387735

• На субклеточном уровне Syk находится в цитоплазме и на клеточной мембране, где он собирается в сигнальные комплексы с фосфорилированными рецепторами или адапторными белками, содержащими ITAM-мотивы.

• Syk широко экспрессируется в гематопоэтических тканях, особенно в линиях B-клеток от про-B до плазматических клеток, а также в нейтрофилах, что подтверждает его роль как в адаптивном, так и во врожденном иммунном ответе. Связанные ссылки: PMID:8163536, PMID:15123770

• Как киназа с двумя SH2-доменами, Syk катализирует фосфорилирование тирозинов и регулируется фосфорилированием и убиквитинированием; мутации связаны с иммунными нарушениями и онкологическими заболеваниями.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для внутриклеточной проточной цитометрии обеспечьте правильную фиксацию и пермеабилизацию, чтобы антитело получило доступ к цитоплазматическому и мембрано-ассоциированному Syk. Валидируйте протокол с использованием известной клеточной линии, экспрессирующей Syk (например, линии B-лимфоцитов), и соответствующего негативного контроля.
• Поскольку иммуноген соответствует последовательности в центральной области человеческого Syk (аа 251-350), это антитело может распознавать обе изоформы (p72-Syk и p70-Syk), если эпитоп консервативен. Подтвердите специфичность в вашем образце с помощью вестерн-блоттинга или масс-спектрометрии, если требуется различение изоформ.
• Титруйте антитело для достижения оптимального индекса окрашивания в вашей экспериментальной системе. Рассмотрите возможность использования красителя жизнеспособности для исключения мертвых клеток, которые могут увеличивать фоновый сигнал в внутриклеточных анализах.
• Всегда включайте изотипический контроль, конъюгированный с тем же флуорофором, для оценки неспецифического связывания.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio поддерживает производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории, предлагая комплексный портфель сырья для ИХА, включая валидированные пары антител, моноклональные антитела и вспомогательные реагенты. Это антитело к Syk является частью нашего предложения для исследований в области иммунологии и сигналинга, способствуя разработке анализов от ранних стадий открытия до клинического применения. Для индивидуальных запросов на поставку или объемных заказов наши эксперты по цепочке поставок могут помочь с оптимизацией сроков поставки и техническими консультациями.