Кроличьи моноклональные антитела против человеческого Nectin-4 для проточной цитометрии - Q96NY8

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация Nectin-4

• Nectin-4, также известный как PVRL4, LNIR и PRR4, представляет собой рецептор суперсемейства иммуноглобулинов, кодируемый геном NECTIN4 у человека (ID гена 81607).
• Он функционирует как молекула клеточной адгезии посредством транс-гомофильных и гетерофильных взаимодействий, специфически взаимодействуя с NECTIN1, и не служит рецептором для проникновения альфа-герпесвирусов.
• Nectin-4 является членом семейства нектинов, которое включает четыре члена (nectin-1 - -4), все содержат три внеклеточных иммуноглобулиновых домена, один трансмембранный домен и цитоплазматический хвост.
• На субклеточном уровне Nectin-4 локализуется в клеточной мембране, клеточных контактах, таких как плотные контакты, а также была обнаружена растворимая секретируемая форма.
• Посттрансляционные модификации включают гликозилирование и образование дисульфидных связей, что способствует его структурной стабильности и функции.
• Nectin-4 преимущественно экспрессируется в плаценте, и хотя он не обнаруживается в нормальном эпителии молочной железы, он экспрессируется при карциноме молочной железы, что указывает на его роль в биологии опухолей.
• Важно отметить, что Nectin-4 действует как клеточный рецептор для вируса кори, способствуя проникновению вируса в клетки-хозяева.
• Белок имеет расчетную молекулярную массу около 55 кДа, с потенциальными изоформами (например, 24 кДа) из-за альтернативного сплайсинга.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевой внеклеточной области (аминокислоты 32–146), которая включает первый Ig-подобный домен, критический для взаимодействий рецептора; эта конструкция, вероятно, нацелена на поверхностно экспонированные эпитопы, что делает ее пригодной для обнаружения нативного Nectin-4 на живых клетках методом проточной цитометрии.
• Поскольку антитело напрямую конъюгировано с , вторичное антитело не требуется, что сводит к минимуму неспецифическое связывание и упрощает протокол окрашивания для проточной цитометрии.
• Для оптимальной производительности титруйте концентрацию антитела для вашей конкретной клеточной линии и эксперимента; рассмотрите возможность тестирования разведений, начиная с 1:20–1:100 для 1×10⁶ клеток, но фактическое оптимальное разведение должно быть определено экспериментально.
• Учитывая сообщаемую тканевую специфичность (плацента, карцинома молочной железы) и субклеточную локализацию (мембрана и секреторный путь), включите соответствующие положительные контроли, такие как ткань плаценты, клеточные линии карциномы молочной железы (например, MCF-7, T47D), и отрицательные контроли (нормальный эпителий молочной железы или модели с нокаутом/нокдауном) для валидации специфичности окрашивания.
• Поскольку Nectin-4 может отщепляться в виде секретируемой формы, в определенных экспериментальных условиях (например, в супернатанте или сыворотке) антитело может обнаруживать растворимый Nectin-4; учитывайте это при анализе данных проточной цитометрии образцов, полученных из супернатантов клеточных культур.
• Для исследований вируса кори это антитело можно использовать для оценки экспрессии Nectin-4 в исследованиях взаимодействия вирус-хозяин; однако убедитесь, что эпитоп не маскируется при связывании вируса или проникновении в клетку.
• Сообщаемые полосы молекулярной массы (24 кДа и 55 кДа) соответствуют альтернативным изоформам; при выполнении ортогональной валидации (например, вестерн-блоттинг) эти размеры могут наблюдаться в восстанавливающих условиях.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и научно-исследовательским институтам комплексный доступ к сырью для IVD, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реактивы оптом и поиск редкого целевого сырья. Для исследований Nectin-4 в онкологии и инфекционных заболеваниях CamelBio может предоставить дополнительные реагенты и услуги по индивидуальной разработке для ускорения создания ваших анализов от концепции до клиники.