Кроличье моноклональное антитело к человеческому LAMP2 для IF/ICC и внутриклеточного FC - P13473

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация LAMP2

• LAMP2 (Лизосом-ассоциированный мембранный гликопротеин 2), также известный как CD107b, LAMP-2, LGP-96 или LGP110, представляет собой сильно гликозилированный трансмембранный белок, кодируемый геном LAMP2. Благодаря альтернативному сплайсингу образуются три основные изоформы: LAMP-2A, LAMP-2B и LAMP-2C, которые различаются цитоплазматическими хвостами и демонстрируют различное распределение в тканях.
• Как ключевой лизосомальный мембранный гликопротеин, LAMP2 играет важную роль в биогенезе лизосом и регуляции pH, выступая в качестве прямого ингибитора протонного канала TMEM175, тем самым способствуя закислению лизосом и оптимальной активности гидролаз. Связанные ссылки: PMID:37390818
• LAMP2 является центральным медиатором шаперон-опосредованной аутофагии (CMA), пути избирательной деградации. Он связывает цитозольные шаперонные комплексы (например, HSPA8/HSC70), которые доставляют белки-мишени, такие как GAPDH, GPX4, NLRP3 и MLLT11, к лизосомальной мембране, где LAMP2 действует как рецептор для транслокации субстратов в лизосому для деградации. Связанные ссылки: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:36586411
• LAMP2 необходим для слияния аутофагосом с лизосомами во время макроаутофагии; клетки, лишенные LAMP2, не способны накапливать STX17 на аутофагосомах, что предотвращает слияние и нарушает деградацию аутофагического груза. Связанные ссылки: PMID:27628032
• LAMP2 способствует эффективному представлению экзогенных антигенов через MHC класса II, обеспечивая лизосомальную деградацию и последующую загрузку антигенных пептидов на формирующиеся молекулы MHC II, хотя он не является обязательным для представления эндогенных антигенов. Связанные ссылки: PMID:15894275, PMID:20518820
• На субклеточном уровне LAMP2 локализуется в основном на лизосомальной мембране, но также обнаруживается в эндосомальных, аутофагосомальных и плазматических мембранах, что отражает его динамический транспорт и функции в эндолизосомальных и аутофагических путях.
• Наблюдаются изоформ-специфичные паттерны экспрессии: LAMP-2A высоко экспрессируется в плаценте, легких и печени, в то время как LAMP-2B и LAMP-2C демонстрируют различное распределение в таких тканях, как селезенка, тимус, мозг и тонкий кишечник. Связанные ссылки: PMID:26856698, PMID:7488019
• Примечательно, что LAMP2 ассоциирован с болезнью Дэнона, гликогенозом, и его изучение включает такие ключевые слова, как альтернативный сплайсинг, аутофагия, дисульфидная связь, гликопротеин и трансмембранная спираль.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 29-375 человеческого LAMP2, охватывая большой люминальный домен, общий для всех изоформ; такое широкое покрытие поддерживает детекцию множественных вариантов LAMP2, где позволяет гомология последовательностей.
• Антитело прямо конъюгировано с , что позволяет проводить одноэтапное окрашивание для иммунофлуоресценции (IF/ICC) и внутриклеточной проточной цитометрии (FC intra) без необходимости во вторичных антителах.
• Для внутриклеточной проточной цитометрии необходимы фиксация и пермеабилизация; используйте стандартные протоколы (например, фиксация 4% PFA с последующей пермеабилизацией сапонином или Triton X-100) и оптимизируйте время инкубации и концентрации антител для вашего конкретного типа клеток.
• Валидируйте работу антитела в соответствующей биологической системе (человек) и включайте соответствующие положительный и отрицательный контроли (например, клетки дикого типа против клеток с нокдауном LAMP2) для подтверждения специфичности.
• Поскольку LAMP2 сильно гликозилирован и существует в виде нескольких изоформ, кажущаяся молекулярная масса при Вестерн-блоттинге может отличаться от предсказанных 44-45 кДа; тестирование методом WB не указано, поэтому при необходимости рассмотрите пилотные эксперименты для проверки возможности детекции.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поиска реагентов

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по поставкам сырья для IVD, технических услуг и консультационной поддержки от концепции до клиники. Для исследователей и разработчиков диагностических систем, фокусирующихся на лизосомальной биологии, аутофагии или путях иммунного представления, мы предлагаем готовые к использованию моноклональные антитела, такие как этот конъюгат anti-LAMP2, а также валидированные пары антител, объемные вспомогательные реагенты и индивидуальный поиск сырья для редких мишеней, чтобы оптимизировать разработку ваших анализов.