кроличье моноклональное антитело против человеческого KIR2DL2/KIR2DL3 для IF/ICC и FC — P43628

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация KIR2DL2/KIR2DL3

• Целевые белки KIR2DL2 и KIR2DL3 относятся к семейству иммуноглобулиноподобных рецепторов клеток-киллеров (KIR). Следующие функциональные сведения основаны на характеристике KIR2DL3 (UniProt P43628).
• KIR2DL3, также известный как CD158b, NKAT2 и NK-рецептор p58, представляет собой ингибирующий рецептор, экспрессируемый на естественных киллерах (NK-клетках).
• Он специфически связывается с аллелями HLA-C (HLA-Cw1, HLA-Cw3 и HLA-Cw7), подавляя активность NK-клеток и предотвращая лизис клеток-мишеней.
• Рецептор является трансмембранным белком, локализованным в клеточной мембране, и на основании его структурных особенностей классифицируется как однопроходный гликопротеин мембраны типа I.
• Структурно он содержит иммуноглобулиноподобные домены и для правильного сворачивания требует дисульфидных связей, что указано в ключевых характеристиках белка.
• Альтернативный сплайсинг гена KIR2DL3 приводит к образованию нескольких изоформ, которые могут различаться по специфичности к лигандам или способности передавать сигналы.
• Кроме того, рецептор подвергается посттрансляционным модификациям, включая гликозилирование, характерное для иммунных рецепторов и влияющее на экспрессию на поверхности клеток.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген включает внеклеточный домен KIR2DL3 (аа 22–245), который, вероятно, содержит нативные эпитопы, подходящие для распознавания как KIR2DL2, так и KIR2DL3 на поверхности клеток.
• Для проточной цитометрии (FC) прямой конъюгат устраняет необходимость детекции вторичным антителом, снижая фон и упрощая протокол окрашивания. При использовании с другими флуорофорами обеспечьте надлежащую компенсацию.
• При проведении иммунофлуоресценции (IF/ICC) этапы фиксации и пермеабилизации следует оптимизировать с учётом локализации мишени в плазматической мембране. Для выявления рецепторов, локализованных на поверхности, можно использовать окрашивание непермеабилизированных клеток.
• Учитывая ограниченную экспрессию рецептора на NK-клетках и некоторых субпопуляциях T-клеток, для первоначальной валидации используйте подходящий положительный контроль, например мононуклеарные клетки периферической крови человека (PBMC) или линии NK-клеток.
• Эффективность антитела может различаться в зависимости от методов подготовки образцов; подберите титр антитела (например, 0,1–1 мкг/мл), чтобы определить оптимальную рабочую концентрацию для конкретного анализа.
• Ожидается перекрёстная реактивность с человеческим KIR2DL2 на основании гомологии последовательностей; однако при необходимости подтвердите специфичность в используемой модельной системе с помощью соответствующих контролей с нокаутом или нокдауном.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по подбору материалов

CamelBio — специализированный универсальный поставщик сырья для IVD, оказывающий поддержку производителям диагностических систем, лабораториям и научно-исследовательским институтам на всех этапах — от разработки концепции до внедрения в клиническую практику. Для исследований рецепторов NK-клеток и иммунного профилирования мы предлагаем широкий ассортимент, включающий валидированные пары антител, флуоресцентные конъюгаты, такие как данное моноклональное антитело против KIR2DL2/KIR2DL3, а также вспомогательные реагенты в различных объёмах. Наши компетенции также включают поиск редких мишеней и разработку антител на заказ для ускорения разработки ваших аналитических методов.