Кроличье моноклональное антитело против человеческого IgG (Fc) для проточной цитометрии - P01857

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация IgG (Fc)

• Мишенью является константный регион (Fc) тяжелой цепи гамма-1 иммуноглобулина человека (IgG1), кодируемый геном IGHG1, что соответствует аминокислотам 100-330 зрелого белка (UniProt P01857). Эта область опосредует эффекторные функции через взаимодействие с Fc-рецепторами и комплементом.
• Тяжелые цепи иммуноглобулинов являются неотъемлемой частью адаптивного иммунитета: мембраносвязанный Ig служит B-клеточным рецептором, а секретируемые антитела нейтрализуют патогены. Fc-регион IgG1 специфически запускает антителозависимую клеточную цитотоксичность, комплемент-зависимую цитотоксичность и фагоцитоз (PubMed:17576170, PubMed:20176268, PubMed:22158414). Связанные ссылки: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• IgG1 состоит из двух идентичных тяжелых цепей, связанных дисульфидными связями с двумя легкими цепями; каждая тяжелая цепь содержит один вариабельный домен (кодируемый сегментами V, D, J) и три константных домена (CH1, CH2, CH3). Домены CH2 и CH3 формируют Fc-фрагмент, на который нацелено данное антитело.
• Ген IGHG1 является частью локуса тяжелых цепей иммуноглобулинов на хромосоме 14, и переключение класса от IgM/IgD к IgG1 происходит в активированных B-клетках, формируя репертуар антител.
• IgG1 является наиболее распространенным изотипом антител в сыворотке человека и имеет решающее значение для долгосрочного гуморального иммунитета, часто используется в качестве каркаса для терапевтических антител.
• Субклеточная локализация: тяжелые цепи IgG1 секретируются в виде антител или экспонируются на поверхности B-клеток в виде мембраносвязанных иммуноглобулинов (трансмембранная форма).
• Посттрансляционные модификации включают образование дисульфидных связей и N-гликозилирование в консервативном домене CH2, что важно для связывания с Fc-рецепторами и стабильности.
• Ключевые слова: адаптивный иммунитет, секретируемый, клеточная мембрана, гликопротеин, иммуноглобулиновый домен, дисульфидная связь.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Антитело конъюгировано с , фотостабильным флуорофором с максимумами возбуждения/излучения ~590/617 нм, совместимым со стандартными проточными цитометрами. Убедитесь в правильных настройках прибора и компенсации.
• Для проточной цитометрии титруйте антитело, чтобы определить оптимальную концентрацию для окрашивания (обычно 0,5-5 мкг на 10^6 клеток), используя положительные и отрицательные контрольные клетки, экспрессирующие человеческий IgG (например, человеческие B-клетки или клеточные линии, экспрессирующие мембранный IgG).
• Поскольку антитело распознает Fc-регион, оно может связываться со свободным IgG в сыворотке или культуральной среде; тщательно промывайте клетки, чтобы снизить фоновый сигнал.
• Данный клон может использоваться для обнаружения поверхностного IgG на человеческих B-клетках или для идентификации покрытых IgG частиц или иммунных комплексов в исследовательских целях.
• Избегайте жесткой фиксации/пермеабилизации, которая может изменить Fc-эпитоп; мягкая фиксация параформальдегидом (1-4%) обычно совместима.
• Используйте реагенты для блокировки Fc-рецепторов при окрашивании клеток с высокой экспрессией FcγR, чтобы предотвратить неспецифическое связывание.
• При необходимости рассмотрите возможность проверки перекрестной реактивности с другими подклассами IgG (IgG2, IgG3, IgG4), так как последовательности Fc-регионов обладают высокой гомологией.

CamelBio: ваш мост для комплексных поставок

CamelBio поддерживает производителей диагностических средств, исследовательские институты и лаборатории комплексными поставками сырья для IVD. Это антитело против человеческого IgG (Fc) дополняет исследования в области иммунологии, инженерии антител и биологии B-клеток. Помимо валидированных первичных антител, CamelBio может поставлять оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты, оптимизируя ваш рабочий процесс от ранней стадии разработки до клинического применения.