Кроличье моноклональное антитело против человеческого цитокератина 8 для внутриклеточной проточной цитометрии - P05787

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация цитокератина 8

• Кератин 8 (K8/CK8), кодируемый геном KRT8, представляет собой белок промежуточных филаментов кератина типа II, который образует облигатные гетерополимеры со своим партнером типа I KRT18 в клетках простого эпителия (PubMed:26823019).
  Связанные ссылки: PMID:26823019
• KRT8 обеспечивает механическую стабильность и устойчивость эпителия, а также защищает клетки от немеханического стресса, такого как апоптоз (By similarity).
• Необходим для опосредованного ARHGEF40 образования актиновых стресс-фибрилл и усиления стресс-фибрилл, индуцированного растягивающим усилием (PubMed:26823019).
  Связанные ссылки: PMID:26823019
• В поперечно-полосатой мышце KRT8 и KRT19 могут связывать сократительный аппарат с дистрофином в костамерах (PubMed:16000376).
  Связанные ссылки: PMID:16000376
• Субклеточная локализация преимущественно в цитоплазматическом цитоскелете, но также обнаруживается в нуклеоплазме и ядерном матриксе.
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование, фосфорилирование, метилирование, убиквитинирование и гликозилирование, которые модулируют его сборку и функцию.
• Тканевая специфичность: экспрессируется в простом эпителии (например, слизистая оболочка десен, твердое небо) и в мышечных волокнах в костамерах.
• Клиническая значимость: ассоциирован с вариантами заболеваний и взаимодействиями хозяин-вирус, что подчеркивает его роль в патологии.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для внутриклеточной проточной цитометрии фиксируйте и пермеабилизируйте клетки с использованием оптимизированных протоколов (например, 4% PFA с последующей обработкой 0.1% Triton X-100 или буферами на основе сапонина), чтобы обеспечить доступ антител к цитозольной кератиновой сети.
• Титруйте антитело, меченное , для определения оптимальной концентрации окрашивания; типичные стартовые разведения находятся в диапазоне от 1:50 до 1:200, но могут варьироваться в зависимости от типа клеток.
• Используйте соответствующие изотипические контрольные антитела для установки порогов стробирования и подтверждения специфичности окрашивания KRT8.
• Клетки HeLa или другие клеточные линии простого эпителия (например, MCF-7) могут служить положительными контролями из-за высокой экспрессии KRT8; рассмотрите возможность использования нокаутных или клеток с нокдауном в качестве отрицательных контролей, если они доступны.
• Защищайте антитело от длительного воздействия света, чтобы предотвратить фотообесцвечивание флуорофора во время окрашивания и сбора данных.
• Иммуноген охватывает почти полноразмерный KRT8 (а.о. 1-483), что предполагает, что антитело, вероятно, распознает нативную конформацию; однако валидация для других применений (например, вестерн-блот, ИГХ) не предоставлена и должна быть проверена независимо.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio — ваш партнер по комплексным поставкам сырья для IVD, обеспечивающий проверенные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, объемные вспомогательные реагенты и решения для сырья с редкими мишенями для производителей диагностических систем, лабораторий и исследовательских институтов. Это антитело против цитокератина 8 идеально вписывается в исследования эпителиальных клеток и разработку диагностики рака, дополняя наш портфель продуктов, связанных с цитоскелетом. От концепции до клиники мы оптимизируем разработку ваших тест-систем благодаря надежным поставкам и экспертным техническим консультациям.