Моноклональное антитело кролика к человеческому CD55 для проточной цитометрии – P08174

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация CD55 (декон-акселерирующий фактор комплемента)

• CD55, также известный как декон-акселерирующий фактор (DAF), представляет собой гликозилфосфатидилинозитол-(GPI-)якорный мембранный белок, относящийся к семейству регуляторов активации комплемента (RCA).
• Он распознает фрагменты C4b и C3b, осажденные на поверхности клеток, и подавляет их способность катализировать конверсию C2 и фактора B, тем самым предотвращая формирование амплифицирующих конвертаз C4b2a и C3bBb. Связанные источники: PMID:7525274
• За счет дестабилизации и ингибирования сборки C3- и C5-конвертаз CD55 защищает собственные клетки от комплемент-опосредованного лизиса и повреждения тканей. Связанные источники: PMID:28657829
• Помимо регуляции комплемента, CD55 выступает в роли клеточного рецептора для различных пикорнавирусов, включая коксакивирус А21, коксакивирусы B1, B3, B5, человеческий энтеровирус 70 и D68, а также эховирусы 6, 7, 11, 12, 20 и 21.
• Он экспрессируется на плазматической мембране практически всех клеток, контактирующих с белками комплемента плазмы, а также на эпителиальных клетках, выстилающих внеклеточные компартменты; растворимые формы также обнаруживаются в биологических жидкостях и внеклеточном матриксе.
• Белок содержит несколько сайтов N-связанного гликозилирования и четыре N-концевых суши-домена (CCP), которые необходимы для связывания лиганда; альтернативный сплайсинг приводит к образованию GPI-якорных и секретируемых вариантов.
• С клинической точки зрения, мутации в гене CD55 связаны с синдромом CHAPLE (гиперактивация комплемента, ангиопатический тромбоз и протеинтеряющая энтеропатия), а молекула несет антигены группы крови Кромер.
• Зрелый полипептид имеет прогнозируемую массу ~41 кДа, но обширное гликозилирование приводит к формированию гетерогенного полосного спектра от 39 кДа до 59 кДа при вестерн-блоттинге.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген покрывает весь внеклеточный домен (аа 35–353), что позволяет предположить, что антитело связывает нативный CD55 на живых клетках; для детекции на поверхности валидируйте окрашивание в условиях непермеабилизации.
• Для проточной цитометрии титруйте антитело в диапазоне 0,1–5 мкг/мл с использованием мононуклеаров периферической крови человека или трансфицированных по CD55 линий клеток для определения оптимальной концентрации.
• Используйте соответствующие контроля по изотипу и реагенты для блокировки Fc-рецепторов, чтобы минимизировать неспецифическое связывание, особенно в образцах с высокой экспрессией FcγR.
• Поскольку CD55 отщепляется от мембраны, при исследовании растворимых форм учитывайте необходимость окрашивания как первичных клеток, так и подходящих супернатантов.
• Проверяйте перекрестную реактивность в вашей конкретной экспериментальной системе; антитело проявляет реактивность к человеческому CD55, но его эффективность у нечеловекообразных приматов или в моделях на грызунах следует подтверждать индивидуально.

CamelBio: ваш единый центр поиска реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических препаратов, контрактным исследовательским организациям и академическим лабораториям сквозной доступ к высококачественным сырьевым материалам для ИВД, техническим услугам и стратегическому консалтингу. Данное моноклональное антитело к CD55, валидированное для проточной цитометрии, поддерживает исследования каскада комплемента и проникновения вирусов в клетки — CamelBio также может поставить валидированные пары антител, крупные партии вспомогательных реагентов и индивидуальный поиск реагентов к редким мишеням, чтобы ускорить разработку вашего анализа от концепции до клинического применения.