Моноклональное антитело кролика против человеческого CD34, меченное , для ИФ/ИК и проточной цитометрии — P28906

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация CD34

• Антиген гемопоэтических прогениторных клеток CD34, кодируемый геном CD34, является общепризнанным маркером гемопоэтических стволовых и прогениторных клеток, а также отмечает эндотелий мелких сосудов.
• В результате альтернативного сплайсинга образуется несколько изоформ; расчетная молекулярная масса канонической изоформы составляет примерно 41 кДа (UniProt: 40716 Да), тогда как более короткий вариант с массой 35 кДа может возникать в результате посттрансляционной обработки или различий изоформ.
• CD34 представляет собой однопроходную трансмембранную гликопротеин типа I, которая, вероятно, функционирует как адгезивная молекула, опосредующая прикрепление стволовых клеток к внеклеточному матриксу костного мозга или стромальным клеткам на ранних этапах гемопоэза.
• Он может служить каркасом для линейно-специфичных гликанов, представляя углеводные лиганды селектина и облегчая межклеточные взаимодействия.
• Субклеточная локализация в основном на клеточной мембране, что соответствует его роли во внеклеточной адгезии и сигнализации.
• Белок подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая N- и O-связанное гликозилирование (гликопротеин) и фосфорилирование, которые могут регулировать его функцию и свойства связывания.
• Экспрессия высокоизбирательна: CD34 обнаруживается на гемопоэтических прогениторных клетках костного мозга и периферической крови, а также на эндотелии мелких сосудов во многих тканях.
• Внеклеточная область (включая аминокислоты 170–290, использованные в качестве иммуногена) содержит несколько сайтов гликозилирования и экспонирована на поверхности клетки, что делает ее доступной мишенью для детекции с помощью антител.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует внеклеточной области (а.к. 170–290) человеческого CD34, что обеспечивает распознавание нативного поверхностного антигена; данное антитело валидировано для применения в ИФ/ИК и проточной цитометрии.
• При иммунофлуоресцентном окрашивании проводите адекватную фиксацию и пермеабилизацию клеток; при необходимости для детекции поверхностного CD34 можно использовать протокол без пермеабилизации.
• При работе с проточной цитометрией включайте соответствующие изотипные контроли и стадию блокады Fc-рецепторов для минимизации неспецифического связывания; титруйте антитело для определения оптимальной концентрации для вашей клеточной системы.
• Экспрессия CD34 ограничена определенными типами клеток; для подтверждения специфичности используйте хорошо охарактеризованные положительные контроли (например, клетки KG-1a, клетки HUVEC или CD34+ гемопоэтические прогениторы) и отрицательные контроли (например, лимфоциты, зрелые клетки крови).
• Хотя данный конъюгат предназначен для ИФ/ИК и ПЦ, при изучении других применений (например, ИГГ, ВБ) проведите валидацию антитела в этих условиях и учитывайте возможные различия в конформации антигена.

CamelBio: ваш единый мост по закупкам реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, исследовательским лабораториям и биотехнологическим компаниям удобный доступ к высококачественному сырью для ИВД, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные антитела и вспомогательные реагенты в больших объемах. Наш универсальный сервис охватывает весь цикл разработки от первоначальной концепции до клинического применения, с фокусом на критические маркеры как CD34 для исследований биологии гемопоэтических стволовых клеток и эндотелия. Независимо от того, нужны ли вам большие объемы реагентов, антитела к редким мишеням или техническая консультация, CamelBio выступает надежным посредником по закупкам для ваших потребностей в области ИВД.