Кроличье моноклональное антитело к человеческому CD33 для проточной цитометрии - P20138

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация CD33

• Миелоидный поверхностный антиген CD33 (Siglec-3, gp67) представляет собой трансмембранный рецептор 1 типа, принадлежащий к семейству сиаловой кислоты-связывающих иммуноглобулин-подобных лектинов (Siglec). Кодируется геном CD33.
• CD33 опосредует межклеточные взаимодействия и поддерживает иммунные клетки в состоянии покоя, преимущественно распознавая и связывая гликаны, содержащие сиаловую кислоту с альфа-2,3- и альфа-2,6-связями. Связанные ссылки: PMID:10611343, PMID:11320212, PMID:15597323, PMID:7718872
• При связывании лиганда (например, C1q или сиалилированных гликопротеинов) иммунорецепторные тирозинсодержащие ингибиторные мотивы (ITIM) в цитоплазматическом хвосте фосфорилируются Src-подобными киназами, такими как LCK, создавая сайты связывания для тирозинфосфатаз PTPN6/SHP-1 и PTPN11/SHP-2. Связанные ссылки: PMID:10887109, PMID:28325905, PMID:10206955, PMID:10556798
• Рекрутированные фосфатазы дефосфорилируют нижестоящие сигнальные молекулы, причем один из репрессивных эффектов зависит от фосфоинозитид-3-киназы/PI3K. Связанные ссылки: PMID:15597323
• CD33 преимущественно экспрессируется на поверхности клеток моноцитарной и миелоидной линий (моноциты, макрофаги, гранулоциты) и, в мозге, на клетках микроглии.
• Субклеточно CD33 локализуется на клеточной мембране и в пероксисомах. Содержит сигнальный пептид, иммуноглобулин-подобный V-тип домен и трансмембранный спиральный участок.
• Белок подвергается альтернативному сплайсингу и посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, N-гликозилирование и образование дисульфидных связей. Прогнозируемая молекулярная масса составляет приблизительно 39,8 кДа, но наблюдаются несколько полос (25 кДа, 33 кДа, 39 кДа) из-за различного гликозилирования и экспрессии изоформ.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (аминокислоты 18-259) охватывает весь внеклеточный домен человеческого CD33, что способствует распознаванию нативной, клеточно-поверхностной формы рецептора.
• Для проточной цитометрии титруйте антитело для определения оптимальной концентрации. Используйте известные CD33-положительные клеточные линии (например, THP-1, U937) или человеческие периферические моноциты крови в качестве положительного контроля.
• Конъюгат позволяет проводить прямое детектирование без вторичных реагентов. Защищайте антитело от света и избегайте повторных циклов замораживания-оттаивания для сохранения интенсивности флуоресценции.
• Если требуется внутриклеточное окрашивание (например, для локализации в пероксисомах), рассмотрите протоколы фиксации и пермеабилизации, совместимые с данным флуорофором.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio поддерживает производителей диагностических систем и исследовательские институты, обеспечивая надежный доступ к высококачественным сырьевым материалам для ИВД, включая валидированные моноклональные антитела, такие как этот клон CD33. Наш портфель охватывает пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, объемные вспомогательные реагенты и поставки редких мишеней — упрощая вашу разработку от концепции до клиники. Позвольте CamelBio стать вашим партнером в эффективных закупках и технических консультациях.