Кроличья моноклональная антитела к человеческому CD28 для проточной цитометрии и стимуляции Т-клеток - P10747

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологические особенности: функция и локализация CD28

• CD28 (Т-клеточно-специфический поверхностный гликопротеин CD28, также известный как Tp44) является членом суперсемейства иммуноглобулинов и функционирует как костимулирующий рецептор, необходимый для активации, пролиферации и выживания Т-клеток.
• Взаимодействие CD28 с его лигандами CD80 (B7-1) или CD86 (B7-2) является критическим вторым сигналом, который усиливает сигналинг через рецептор Т-клеток (TCR), что приводит к увеличению продукции интерлейкина-2 (IL-2) и расширению популяции Т-клеток. Связанные источники: PMID:1650475, PMID:12196291, PMID:35397202
• Сигналинг CD28 рекрутирует протеинкиназу С-тета (PRKCQ) и адаптерный белок GRB2, активируя NF-κB через зависимые и независимые от PI3K/Akt пути для модуляции экспрессии генов в Т-клетках. Связанные источники: PMID:24665965, PMID:21964608, PMID:7568038
• В сочетании с костимуляцией через TCR/CD3 и CD40L, CD28 усиливает продукцию цитокинов Th2 типа — IL-4 и IL-10, способствуя гуморальным иммунным ответам. Связанные источники: PMID:8617933
• CD28 синергирует с CD40L для активации NF-κB и нижестоящих киназ MAPK8 и PAK2, дополнительно разнообразя эффекторные функции Т-клеток. Связанные источники: PMID:15067037
• CD28 преимущественно экспрессируется на клеточной поверхности Т-клеток и плазматических клеток, но отсутствует на менее зрелых В-клетках.
• Белок CD28 представляет собой трансмембранный гликопротеин с внеклеточным иммуноглобулиноподобным доменом, одной трансмембранной спиралью и цитоплазматическим хвостом, содержащим сигнальные мотивы. Пост-трансляционные модификации включают дисульфидные связи, гликозилирование и фосфорилирование.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ CD28, которые могут тонко регулировать костимулирующие сигналы в различных субпопуляциях Т-клеток.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген — рекомбинантный человеческий белок CD28 — вероятно включает внеклеточный домен, поэтому антитело подходит для детекции нативного клеточно-поверхностного CD28 методом проточной цитометрии. Для определения оптимального рабочего разведения проведите титрование на линиях человеческих Т-клеток или ПБМК.
• Для активации Т-клеток in vitro используйте антитело в комбинации с антителом к CD3 для получения костимулирующих сигналов. Иммобилизация на планшете или сшивка может усилить кластеризацию; в пилотных экспериментах оптимизируйте концентрацию и длительность стимуляции.
• При использовании этого антитела для функциональной блокады или деплеции предварительно проинкубируйте его с рекомбинантным белком CD28, чтобы подтвердить специфичность наблюдаемых эффектов.
• Стратегии гейтирования при проточной цитометрии должны включать дискриминацию живых и мертвых клеток и соответствующие изотипные контроли для точной количественной оценки экспрессии CD28 на субпопуляциях Т-клеток.
• Валидируйте перекрестную реактивность в вашей экспериментальной системе: антитело проявляет реакцию с человеческим CD28, но необходимо исключить неспецифическое связывание в контексте ваших образцов.

CamelBio: ваш единый центр по закупке реагентов

CamelBio упрощает закупку сырья для IVD производителям диагностических препаратов и исследовательским лабораториям. Наша моноклональная антитела к CD28 является примером нашей приверженности предоставлению высококачественных реагентов для исследования биологии Т-клеток и иммуноонкологии. от оптимизированных пар антител для сэндвич-иммуноанализов до оптовых партий вспомогательных реагентов — мы ускоряем разработку от концепции до клинических испытаний.