Моноклональное кроличье антитело к человеческому CD146 для проточной цитометрии — P43121

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация CD146

• CD146, также известный как MUC18 или MCAM, представляет собой поверхностную клеточную гликопротеин из надсемейства иммуноглобулинов, кодируемую геном MCAM (ID гена: 4162). Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ.
• Он опосредует кальцийнезависимую клеточную адгезию и поддерживает целостность эндотелиального монослоя в межклеточных контактах сосудистой ткани.
• При меланоме считается, что экспрессия CD146 позволяет опухолевым клеткам взаимодействовать с сосудистым эндотелием, способствуя гематогенному распространению и метастазированию.
• Белок функционирует как поверхностный рецептор: при связывании с лигандом запускается тирозинная фосфорилирование FYN и PTK2/FAK1, а также наблюдается транзиторное повышение концентрации внутриклеточного кальция.
• Во время эмбриогенеза CD146 может выступать в роли адгезивной молекулы, направляющей миграцию клеток нервного гребня.
• Исследования иммуно локализации показывают, что CD146 расположен на плазматической мембране; его внеклеточная область содержит иммуноглобулиноподобные домены, сайты N-связанного гликозилирования и дисульфидные связи, а цитоплазматический хвост подвергается фосфорилированию.
• Предсказанная молекулярная масса составляет примерно 71,6 кДа; однако зрелый гликозилированный белок при электрофорезе в ПААГ с додецилсульфатом натрия мигрирует в виде полосы с молекулярной массой 57–71 кДа.
• В нормальных взрослых тканях экспрессия CD146 ограничена гладкомышечными и эндотелиальными клетками, но при распространенных первичных меланомах и метастатических очагах она сильно повышена, что делает CD146 маркером прогрессии опухоли.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (аминокислоты 24–559) покрывает весь внеклеточный домен человеческого CD146, поэтому ожидается, что это антитело распознает нативный белок на поверхности живых нефиксированных клеток, что является критическим требованием для проточной цитометрии.
• Проведите титрование антитела в вашем проточном цитометрическом анализе, чтобы определить оптимальную концентрацию, обеспечивающую четкое разделение положительных и отрицательных популяций клеток.
• Всегда используйте подходящие контролы изотипа, одноцветные компенсационные контроли и краситель для определения жизнеспособности, чтобы исключить мертвые клетки из анализа.
• Валидируйте окрашивание на хорошо охарактеризованных клеточных линиях, экспрессирующих CD146 (например, меланома A375), или на первичных опухолевых образцах, в которых известно о повышении экспрессии MCAM.
• Поскольку флуорофор чувствителен к свету, храните конъюгат в защищенном от света месте, избегайте повторных циклов замораживания-размораживания и перед каждым использованием кратковременно центрифугируйте пробирку для удаления агрегатов.

CamelBio: ваш единый центр поставок биологических реагентов

CamelBio поддерживает производителей диагностических тест-систем, исследовательские лаборатории и биотехнологических специалистов, предоставляя комплексный доступ к сырью для ИВД, техническим консультациям и решениям для управления цепочками поставок — от разработки концепции до клинических испытаний. В области онкологии и сосудистой биологии наш портфель включает оптимизированные моноклональные антитела, такие как этот конъюгат против CD146, а также валидированные пары антител, объемные поставки вспомогательных реагентов и поиск реагентов для редких мишеней под заказ. Сотрудничество с CamelBio позволяет упростить закупки, сократить сроки поставки и ускорить разработку ваших аналитических систем.