Кроличье моноклональное антитело к RAB10 для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, ELISA - P61026

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация RAB10

• Ras-родственный белок Rab-10 (RAB10) — это малая GTPаза, принадлежащая к семейству Rab молекулярных переключателей, регулирующих внутриклеточный мембранный трафик. Она циклирует между неактивной GDP-связанной и активной GTP-связанной формами, рекрутируя эффекторные белки для контроля образования, движения, заякоривания и слияния везикул. Связанные ссылки: PMID:21248164

• RAB10 преимущественно участвует в биосинтетическом транспорте от аппарата Гольджи к плазматической мембране. Она регулирует доставку везикул, обогащенных транспортером глюкозы SLC2A4/GLUT4, TLR4 на поверхность клетки, и поддерживает асимметричный транспорт белков, влияя таким образом на гомеостаз глюкозы и врожденный иммунитет.

• В поляризованных клетках RAB10 опосредует базолатеральный транспорт из транс-сети Гольджи. В нейронах она способствует аксоногенезу, направляя везикулярный мембранный трафик к аксональной плазматической мембране. Связанные ссылки: PMID:16641372

• RAB10 участвует в динамике эндоплазматического ретикулума (ЭПР), контролируя образование трубочек вдоль микротрубочек и их слияние. Она также играет роль в созревании фагосом и базолатеральном пути рециклирования. Связанные ссылки: PMID:23263280

• Вместе с LRRK2, RAB8A и RILPL1, RAB10 регулирует цилиогенез. Фосфорилирование по Thr-73 киназой LRRK2 способствует связыванию с RILPL1, ингибируя образование ресничек. Связанные ссылки: PMID:30398148

• RAB10 направляется к стрессированным лизосомам после фосфорилирования LRRK2, способствуя внеклеточному высвобождению содержимого лизосом через эффекторы EHBP1 и EHNP1L1. Она также облегчает экспорт части вновь синтезированных белков через эндосомный путь, зависимый от Rab8-Rab10-Rab11. Связанные ссылки: PMID:30209220, PMID:32344433

• Белок локализован в нескольких мембранных компартментах, включая цитоплазматические везикулы, аппарат Гольджи, транс-сеть Гольджи, эндосомы (рециклирующие и фагосомы), ЭПР, лизосомы и базальное тельце реснички. Экспрессируется в гиппокампе, нейтрофилах и семенниках.

• RAB10 подвергается пренилированию для заякоривания в мембране, а также известна ее модификация путем фосфорилирования, ацетилирования и убиквитинирования. Она вовлечена в нейродегенерацию и микробный патогенез, поскольку способствует репликации Legionella pneumophila, ремоделируя вакуоли в компартменты, подобные ЭПР.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический пептид, соответствующий аминокислотам 101–200 белка RAB10 человека. Эта центральная область консервативна у человека, мыши и крысы, что согласуется с заявленной перекрестной реактивностью. При использовании этого антитела для Вестерн-блоттинга ожидается специфичная полоса около 23 кДа; рекомендуется использовать соответствующие положительные и отрицательные клеточные лизаты для валидации работы.
• Для иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии RAB10 демонстрирует точечное распределение, соответствующее ее ассоциации с цитоплазматическими везикулами, аппаратом Гольджи и эндосомами. Условия пермеабилизации и фиксации могут потребовать оптимизации для сохранения этой картины. Совместное окрашивание с маркерами органелл может помочь подтвердить специфичность.
• Антитело также подходит для ELISA. Как и в любом иммуноанализе, рекомендуется титровать антитело для определения оптимальной рабочей концентрации для вашей конкретной системы образцов.
• Обратите внимание, что RAB10 может быть фосфорилирована (например, LRRK2), что может повлиять на детекцию, если эпитоп окажется скрыт. Проверяйте реактивность в соответствующих экспериментальных условиях.

CamelBio: Ваш единый источник поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям интегрированный доступ к валидированным сырьевым материалам для ИВД, включая моноклональные антитела, такие как анти-RAB10 для применения в Вестерн-блоттинге, IF/ICC и ELISA. Помимо данного продукта, мы поддерживаем ваши проекты, связанные с RAB10, в области мембранного трафика и клеточной биологии, предлагая оптимизированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальные решения по поиску редких мишеней.