Кроличья pAb к фосфо-Src-Y529 для WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P12931

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация Src

• Тирозинпротеинкиназа протоонкогена Src (c-Src) — это нерецепторная тирозинкиназа размером ~60 кДа, кодируемая геном SRC (ID гена: 6714). Альтернативные названия включают ASV, SRC1, THC6 и p60-Src. В результате альтернативного сплайсинга возникают три изоформы, причем изоформа 1 представляет собой каноническую последовательность.
• Src опосредует трансдукцию сигналов от различных типов рецепторов (иммунных, интегриновых, факторов роста, GPCR), контролируя транскрипцию генов, иммунный ответ, клеточную адгезию, прогрессирование клеточного цикла, апоптоз, миграцию и трансформацию (PubMed:34234773, PubMed:21411625). Связанные ссылки: PMID:34234773, PMID:21411625
• Посредством фосфорилирования субстратов, таких как AFAP1, кортактин (CTTN), FAK (PTK2) и паксиллин, Src координирует реорганизацию цитоскелета, динамику фокальных контактов и сигналинг клеточных контактов.
• Src локализуется в клеточной мембране, внутренней мембране митохондрий, ядре, цитоплазме, цитоскелете и клеточных контактах, обеспечивая пространственно ограниченный сигналинг.
• Антитело специфически распознает Src, фосфорилированный по Tyr529 — консервативному остатку в C-концевом хвосте, фосфорилирование которого киназой Csk поддерживает автоингибированную закрытую конформацию. Дефосфорилирование или смещение взаимодействия pTyr529–SH2 подготавливает Src к активации.
• Экспрессия Src является повсеместной; однако тромбоциты, нейроны и остеокласты демонстрируют уровень экспрессии в 5–200 раз выше, чем большинство других тканей. Экспрессия также была обнаружена в коже (PubMed:22294297). Связанные ссылки: PMID:22294297
• В остеокластах Src необходим для резорбции кости, действуя через комплекс PTK2B/PYK2 и фосфорилируя CBL для активации сигналинга PI3K (PubMed:14585963, PubMed:8755529). Он также способствует выработке энергии, активируя цитохром c-оксидазу (PubMed:12615910). Связанные ссылки: PMID:14585963, PMID:8755529, PMID:12615910
• Src участвует в противовирусном врожденном иммунитете, усиливая сигналинг, опосредованный RIG-I (PubMed:19419966), и опосредует регенерацию эпителия, вызванную IL6, через путь YAP1‑NOTCH (PubMed:25731159). Связанные ссылки: PMID:19419966, PMID:25731159

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфопептид, соответствующий области Y529; убедитесь, что подготовка образца сохраняет фосфорилирование (используйте ингибиторы фосфатаз) и включите нефосфорилированные контроли для проверки специфичности.
• Для вестерн-блоттинга предсказанный молекулярный вес Src составляет ~60 кДа; должна наблюдаться полоса этого размера. Рассмотрите возможность использования блокировки 5% BSA для снижения неспецифического связывания.
• В IHC‑P и IF/ICC методы восстановления антигена могут повлиять на сохранность фосфо-эпитопов; рекомендуется мягкое восстановление на основе цитрата и обработка при низкой температуре.
• Обнаружение фосфо-Src-Y529 методом ELISA можно использовать в сочетании с антителами к общему Src для оценки уровней сайт-специфического фосфорилирования в лизатах клеток.
• Ожидается кросс-реактивность с мышиным и крысиным Src на основе гомологии последовательностей; провалидируйте в соответствующей системе образцов.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет комплексную платформу для закупки сырья для IVD, включая валидированные фосфоспецифические антитела, такие как это pAb против фосфо-Src-Y529. Для разработчиков диагностических тестов и исследователей, изучающих сигналинг киназ, CamelBio также предлагает подобранные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск редких мишеней. От концепции до клиники CamelBio поддерживает производителей интегрированными поставками сырья, техническими услугами и консалтингом — упрощая закупки для исследований трансдукции сигналов и не только.