Phospho-SMO-S616 Rabbit pAb - Q99835

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация белка Smoothened

• Белок Smoothened (SMO), также известный как белок Gx, представляет собой GPCR-рецептор (рецептор, сопряженный с G-белком), который действует как центральный трансдуктор сигнального пути хеджхог, необходимый для эмбрионального развития и участвующий в развитии рака. Связанные ссылки: PMID:19592253, PMID:27437577, PMID:28344083
• SMO активируется связыванием холестерина при стимуляции лигандом хеджхог, что приводит к опосредованной G-белком G(i) ингибированию аденилатциклазы и снижению уровня цАМФ, что, в свою очередь, высвобождает факторы транскрипции GLI для регуляции экспрессии генов-мишеней. Связанные ссылки: PMID:28344083, PMID:31168089
• В дополнение к канонической модуляции цАМФ, активный SMO напрямую связывает и ингибирует каталитическую субъединицу PRKACA протеинкиназы A (PKA) на клеточной мембране, предотвращая фосфорилирование и процессинг факторов транскрипции GLI. Связанные ссылки: PMID:36202993, PMID:39138140
• SMO также способствует удалению GPR161, ключевого негативного регулятора, из первичной реснички, обеспечивая надежную активацию пути (По сходству). SMO локализуется на клеточной мембране и обогащен в мембране первичной реснички — внутриклеточной нише, критической для трансдукции сигнала.
• Белок подвергается посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование (в том числе в положении Ser616), гликозилирование, липидирование (связывание холестерина) и образование дисульфидных связей, как указано ключевыми словами UniProt, и классифицируется как трансмембранный рецептор, участвующий в сигнализации развития.
• Дисфункция SMO связана с нарушениями развития и раком; его активность жестко регулируется вышестоящим ингибитором patched (PTCH1/2) и доступом холестерина.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфорилированный пептид в области Ser616 человеческого SMO, что обеспечивает специфичность к фосфорилированной форме; перекрестную реактивность с нефосфорилированной формой следует оценить с использованием отрицательных контролей.
• Для вестерн-блоттинга (WB) ожидается полоса около 86 кДа; оптимизируйте блокировку и разведение антитела для снижения фона, обусловленного экспрессией эндогенного SMO.
• В ELISA и дот-блотте (DB) используйте фосфорилированный пептид в качестве положительного контроля и неф нефосфорилированный пептид для подтверждения специфичности фосфорилирования; рассмотрите возможность проведения пептидных конкурирующих анализов для валидации.
• Учитывая, что SMO локализуется в ресничках, иммунодетекция в лизатах целых клеток может быть затруднительна; рассмотрите стратегии обогащения или иммунофлуоресценцию для изучения ресничечной локализации.
• Антитела обладают перекрестной реактивностью с человеческим SMO; для других видов перед использованием убедитесь в гомологии последовательности в сайте фосфорилирования.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio — специализированный партнер по комплексным закупкам сырья для IVD, предлагающий валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реактивы в больших объемах, а также индивидуальный поиск редкого сырья. Для исследователей, изучающих путь хеджхог и сигнализацию Smoothened, CamelBio обеспечивает беспрепятственный доступ к высококачественным фосфорилированным антителам против SMO и сопутствующим техническим консультациям, поддерживая ваш путь от идеи до клиники.