Фосфо-Smad5 (S463/S465) кроличий моноклональный антитело для Вестерн-блоттинга, ИФА - Q99717

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация Smad5

• SMAD5 (Mothers against decapentaplegic homolog 5, также известный как JV5-1, MADH5) является транскрипционным регулятором, принадлежащим к семейству SMAD. Он играет важную роль в эмбриональном развитии, клеточной дифференцировке, ангиогенезе и поддержании гомеостаза тканей. Связанные ссылки: PMID:12064918 PMID:16516194

• При стимуляции лигандом BMP SMAD5 фосфорилируется по остаткам Ser463 и Ser465 активированными рецепторами BMP I типа. Это фосфорилирование способствует его ассоциации с SMAD4 с образованием гетеромерного комплекса, который транслокируется в ядро, где он регулирует экспрессию генов, связываясь с элементами связывания Smad (SBEs) в регионах промоторов. Связанные ссылки: PMID:9442019 PMID:33510867

• В дополнение к своей роли фактора транскрипции, нефосфорилированный SMAD5 функционирует в цитоплазме, регулируя энергетический метаболизм. Он усиливает митохондриальное дыхание и гликолиз, взаимодействуя с гексокиназой 1 (HK1), тем самым ускоряя гликолиз в ответ на изменения pH цитоплазмы. Связанные ссылки: PMID:28675158

• Белок локализуется в цитоплазме, ядре и митохондриях, что отражает его разнообразные роли в сигнальных путях и метаболизме.

• SMAD5 экспрессируется повсеместно, что согласуется с его широким участием в фундаментальных клеточных процессах.

• Ключевые посттрансляционные модификации включают фосфорилирование по S463/S465 (критическое для активации) и ацетилирование. Белок содержит домены, связывающие цин, и был подтвержден прямым секвенированием белка.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический фосфорилированный пептид, охватывающий сайт двойного фосфорилирования (S463/S465). Рассмотрите возможность использования нефосфорилированного пептида в качестве контроля блокировки для подтверждения специфичности фосфорилирования в Вестерн-блоттинге.
• Для Вестерн-блоттинга прогнозируемый молекулярный вес составляет 52 кДа. Проверьте полосу в соответствующих линиях клеток человека, обработанных лигандами BMP для индуцирования фосфорилирования Smad5. Лизаты необработанных клеток или лизаты, обработанные фосфатазой, могут служить в качестве отрицательного контроля.
• В применениях ИФА титруйте антитело для определения оптимальной рабочей концентрации. Планшеты, покрытые фосфо-пептидом, могут повысить специфичность.
• Поскольку SMAD5 повсеместно распространен, убедитесь, что подготовка образцов и контроли загрузки согласованы между различными тканями или типами клеток.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio — это специализированный партнер по комплексным закупкам реагентов для IVD, поддерживающий производителей диагностических средств и исследовательские лаборатории от концепции до клиники. Для исследований сигнального пути BMP и Smad5 мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и можем помочь с поиском реагентов для редких мишеней. Независимо от того, нужны ли вам готовые реагенты или индивидуальные решения, наша платформа упрощает процесс закупок и ускоряет разработку анализов.