Фосфо-Smad2-S465/S467 + Smad3-S423/S425 кроличьи мАт для Вестерн-блоттинга, ИФА - Q15796/P84022

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация SMAD2

• SMAD2 (Mothers against decapentaplegic homolog 2), также известный как MADH2 или MADR2, представляет собой регулируемый рецептором SMAD (R-SMAD), который служит внутриклеточным передатчиком сигнала для киназ рецепторов TGF-бета и активина типа 1.
• При связывании лиганда SMAD2 фосфорилируется по C-концевым остаткам серина S465/S467, что приводит к формированию комплекса с SMAD4 и транслокации в ядро, где он связывается с элементами TRE для регуляции транскрипции генов.
• Он положительно модулирует активность киназы PDPK1, способствуя диссоциации от белка 14-3-3 YWHAQ, ключевого отрицательного регулятора.
• SMAD2 может функционировать как супрессор опухоли при колоректальном раке. Связанные ссылки: PMID:8752209
• На субклеточном уровне SMAD2 локализуется как в цитоплазме, так и в ядре, при этом динамическое перемещение контролируется статусом фосфорилирования.
• Экспрессия в тканях наиболее выражена в скелетных мышцах, эндотелиальных клетках, сердце и плаценте.
• Посттрансляционные модификации, включая фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование, точно настраивают активность и стабильность SMAD2.
• Это антитело обнаруживает двойной фосфорилирование по S465/S467 SMAD2 и гомологичным участкам S423/S425 SMAD3, оба из которых критичны для активации в сигнальном трансдукции TGF-бета.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Кроличье моноклональное антитело было получено с использованием синтетического фосфопептида, окружающего S465/S467 человеческого SMAD2, что обеспечивает специфичность к активированному фосфорилированному состоянию.
• Для вестерн-блоттинга включайте ингибиторы фосфатаз в буферы для лизиса для сохранения фосфорилирования мишени. Ожидаемые основные полосы: ~52 кДа (SMAD2) и ~48 кДа (SMAD3); дополнительные полосы на ~25, 35 и 43 кДа могут представлять продукты расщепления или изоформы. Проверьте специфичность с помощью контроля, обработанного фосфатазой, или нокдауна siRNA.
• Для ИФА рассмотрите возможность нормализации фосфорилированного сигнала к общему уровню SMAD2/3 с использованием пан-антитела; оптимизируйте экспериментальные условия эмпирическим путем.
• Перекрестная реактивность наблюдалась с белками человека, мыши и крысы; подтвердите уровень эндогенного фосфорилирования в вашей экспериментальной системе с помощью соответствующей стимуляции TGF-бета.

CamelBio: Ваш мост для закупок полного цикла

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и исследовательским институтам упрощенный путь к закупке сырья для IVD. Это фосфо-антитело к SMAD2/3 является частью нашего обширного портфеля, поддерживающего исследования сигнального пути TGF-бета и онкологии. От валидированных пар антител и оптимизированных моноклональных/поликлональных реагентов до объемных вспомогательных материалов и поиска редких мишеней, CamelBio соединяет концепцию с клиникой.