Фосфо-Smad2 (S245/S250/S255) Кроличье mAb для Вестерн-блоттинга и ИФА - Q15796

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация SMAD2

• SMAD2 (Mothers against decapentaplegic homolog 2) – это SMAD, регулируемый рецептором (R-SMAD), который функционирует как внутриклеточный трансдьюсер сигнала и транскрипционный модулятор для TGF-бета (трансформирующего фактора роста) и киназ рецептора активина 1 типа.
• После фосфорилирования по C-концевому мотиву SXS (сериновые остатки 465 и 467) SMAD2 образует комплекс с SMAD4 и транслоцируется в ядро, где связывается с TGF-бета-чувствительным элементом (TRE) в промоторах генов-мишеней для регуляции транскрипции.
• SMAD2 положительно регулирует активность киназы PDPK1, стимулируя ее диссоциацию от ингибиторного белка 14-3-3 YWHAQ.
• Рассматривается как супрессор опухолей при колоректальной карциноме. Связанные ссылки: PMID:8752209
• На субклеточном уровне SMAD2 перемещается между цитоплазмой и ядром, что соответствует его роли в передаче сигнала.
• Белок экспрессируется на высоком уровне в скелетных мышцах, эндотелиальных клетках, сердце и плаценте.
• Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование, которые регулируют его активность, стабильность и взаимодействия.
• Альтернативный сплайсинг генерирует несколько изоформ, и белок содержит домен связывания ионов цинка (домен MH1), который опосредует связывание с ДНК.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Данное антитело получено против фосфорилированного пептида; буферы для лизиса образцов должны содержать ингибиторы фосфатаз (например, ортованадат натрия, фторид натрия) для сохранения статуса фосфорилирования во время подготовки.
• Для Вестерн-блоттинга рекомендуется использовать как необработанные, так и стимулированные TGF-β/активином клеточные лизаты для подтверждения сдвига полос, зависящего от активации.
• Рекомендуемое начальное разведение для Вестерн-блоттинга – 1:500–1:2000, но оптимальная концентрация должна определяться эмпирически в вашей конкретной системе образцов.
• В ИФА использование блокирующего буфера с низкой фосфатазной активностью может снизить фон; рассмотрите возможность проведения конкурентного анализа с фосфопептидом для проверки специфичности.
• Поскольку это кроличье моноклональное антитело, для детекции используйте вторичное антитело против IgG кролика (H+L), конъюгированное с HRP или AP.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio сотрудничает с производителями диагностических систем и исследовательскими институтами, предоставляя комплексный портфель сырья для ИФА, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты оптом. Для проектов, нацеленных на сигнальный путь TGF-бета или детекцию фосфо-SMAD2, CamelBio предлагает индивидуальную поддержку в поставках, чтобы ускорить разработку вашего анализа от концепции до клиники.