Фосфо-Rpb1 CTD-T4 Кроличье mAb для Вестерн-блоттинга, ИФА - P24928

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация субъединицы RPB1 ДНК-зависимой РНК-полимеразы II

• Субъединица RPB1 ДНК-зависимой РНК-полимеразы II является каталитическим ядром Pol II, ответственным за синтез пре-мРНК и некодирующих РНК в транскрипционном цикле, включающем инициацию, элонгацию и терминацию. Связанные ссылки: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:28108474
• RPB1 формирует активный центр вместе с субъединицей RPB2, катализируя добавление нуклеотидов через DxDGD мотив, координирующий ион Mg²⁺, и осуществляет коррекцию ошибочно включенных нуклеотидов с помощью 3′→5′ экзонуклеазной активности. Связанные ссылки: PMID:8381534, PMID:9852112, PMID:30190596
• Уникальный C-концевой домен (CTD) RPB1, состоящий из 52 гептапептидных повторов, служит динамической платформой для транскрипционно-сопряженных процессов; фосфорилирование по Ser5 способствует уходу от промотора, а фосфорилирование Ser2 критически важно для элонгации и процессинга пре-мРНК. Ацетилирование и метилирование лизинов CTD дополнительно тонко регулируют экспрессию генов. Связанные ссылки: PMID:24207025, PMID:26124092
• Помимо ДНК-зависимой транскрипции, RPB1 обладает РНК-зависимой РНК-полимеразной активностью, которая удлиняет некодирующие РНК, и может действовать как репликаза/транскриптаза для вируса гепатита дельта.
• RPB1 локализуется в основном в ядре и на хромосомах, но также может обнаруживаться в цитоплазме.
• Посттрансляционные модификации RPB1 включают фосфорилирование, ацетилирование, метилирование, убиквитинирование и ISGилирование, регулирующие его активность и взаимодействия.
• Мутации в гене POLR2A связаны с нарушениями нейроразвития, включая интеллектуальную недостаточность (NEDHIB).

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• При выполнении Вестерн-блоттинга включайте ингибиторы фосфатаз в лизирующие буферы для сохранения фосфорилирования по T4 и используйте градиентный или высокопроцентный разделяющий гель для четкого разделения полосы 217 кДа.
• Для ИФА рассмотрите возможность иммобилизации фосфорилированного пептида или фосфо-обогащенных белковых экстрактов для подтверждения специфичности к модифицированному эпитопу.
• Перекрестная реактивность антитела с белками человека, мыши и крысы указывает на консервативность мотива T4; валидируйте в соответствующем виде и типе образца для вашей экспериментальной системы.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio предлагает комплексный портфель сырья для IVD в области исследований транскрипции и хроматина, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела к модификациям РНК-полимеразы II, а также вспомогательные реагенты оптом. Для специализированных потребностей, таких как редкие фосфо-специфичные мишени или дизайн индивидуальных иммуногенов, наши услуги по закупкам помогут вам эффективно получить необходимые материалы.