Фосфо-Raf1-S338 Кроличьи pAb для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФА - P04049

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация Raf1

• RAF1 кодирует серин/треонин-протеинкиназу Raf-1 (также известную как c-RAF), критический трансдуктор сигнального пути RAS-RAF-MEK-ERK, который регулирует пролиферацию, дифференцировку, апоптоз и онкогенную трансформацию клеток.
• Активация Raf1 требует фосфорилирования по Ser338 (и Ser339) киназой PAK1, что запускает каскад реакций: Raf1 фосфорилирует и активирует MEK1/2, которые, в свою очередь, фосфорилируют ERK1/2.
• Фосфорилированный Raf1 (p-Ser338) также непосредственно фосфорилирует белок BAD по Ser75, ингибируя его проапоптотическую функцию и способствуя выживанию клеток.
• Raf1 распределен в нескольких клеточных компартментах — цитоплазме, клеточной мембране, митохондриях и ядре — что обеспечивает контекст-зависимую передачу сигнала; митохондриальный Raf1 связывается с BCL2, блокируя апоптоз.
• В скелетных мышцах изоформа 1 Raf1 более распространена, чем изоформа 2, что указывает на тканеспецифичную регуляцию.
• Мутации в гене RAF1 связаны с синдромом Нунан и гипертрофической кардиомиопатией, а сам ген является хорошо установленным протоонкогеном, часто гипер-активируемым при раковых заболеваниях у человека.
• Ключевые посттрансляционные модификации включают фосфорилирование по серину/треонину/тирозину, метилирование и убиквитинирование, которые тонко регулируют активность и стабильность Raf1.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический фосфорилированный пептид вокруг Ser338; таким образом, антитело специфично распознает Raf1 только при фосфорилировании в этом сайте. Для вестерн-блоттинга включайте ингибиторы фосфатаз в лизирующие буферы и рассмотрите возможность обработки образцов EGF или сывороткой для стимуляции фосфорилирования.
• Для ИГХ-П проверяйте фосфоспецифичность, сравнивая окрашивание с обработкой фосфатазой и без нее; условия демаскировки антигена могут потребовать оптимизации для фосфорилированных эпитопов.
• Данное антитело валидировано для WB, IHC-P и ELISA. При проведении количественного ИФА используйте соответствующие фосфо-пептидные и нефосфо-пептидные контроли для подтверждения специфичности.
• На основании данных поставщика демонстрирует перекрестную реактивность с Raf1 человека, мыши и крысы; валидируйте в желаемой системе образцов для обеспечения стабильной работы.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio — ваш всесторонний партнер в поставках сырья для in vitro диагностики, от концепции до клиники. Наш каталог включает это антитело Phospho-Raf1-S338 Rabbit pAb, идеальное для исследований пути MAPK и диагностики рака. Нужны ли вам валидированные пары антител, моноклональные/поликлональные антитела оптом или реагенты для редких мишеней — CamelBio обеспечивает надежные поставки и техническую поддержку для ускорения разработки ваших тест-систем.