Phospho-POLR2A CTD- S2/S5 Rabbit pAb - P24928

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: Функция и локализация POLR2A

• Субъединица RPB1 ДНК-направленной РНК-полимеразы II является каталитическим ядерным компонентом РНК-полимеразы II (Pol II), отвечающим за синтез предшественников мРНК и многих функциональных некодирующих РНК. Связанные ссылки: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596
• Транскрипционный цикл Pol II проходит стадии инициации, элонгации и терминации, при этом фермент образует активный центр вместе со второй по величине субъединицей POLR2B/RPB2. Связанные ссылки: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:28108474
• POLR2A достраивает нуклеотиды посредством механизма, зависящего от Mg(2+), и обладает 3' -> 5' экзонуклеазной активностью коррекции (proofreading) для исправления неверно встроенных рибонуклеотидов. Связанные ссылки: PMID:30190596, PMID:8381534, PMID:9852112
• Уникальный C-концевой домен (CTD), состоящий из 52 гептапептидных повторов, служит платформой для регуляции транскрипции; фосфорилирование по Ser5 опосредует выход промоутера, тогда как фосфорилирование по Ser2 необходимо для снятия паузы и процессинга пре-мРНК. Связанные ссылки: PMID:24207025, PMID:26124092
• Метилирование и ацетилирование CTD также регулируют экспрессию генов: ацетилирование связано с индукцией ранних генов, в то время как метилирование подавляет экспрессию генов-мишеней.
• Субклеточная локализация включает ядро, цитоплазму и хромосомы, что согласуется с его ролью в транскрипции и процессинге РНК.
• POLR2A также функционирует как РНК-зависимая РНК-полимераза, удлиняя некодирующие РНК и действуя как репликаза для вируса гепатита дельта.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический пептид, разработанный на основе сайтов фосфорилирования S2/S5 повтора YSPTSPS CTD POLR2A, что позволяет предположить, что антитело может распознавать как фосфорилированный Ser2, так и Ser5.
• Для Вестерн-блоттинга, учитывая большой молекулярный вес (~217 кДа), рекомендуется использовать гели SDS-PAGE с низким процентом акриламида (например, 6-8%) и увеличить время переноса; включение ингибиторов фосфатаз в лизирующий буфер рекомендуется для поддержания фосфорилирования.
• Специфичность можно оценить путем обработки образцов лямбда-фосфатазой или с помощью пептидных конкурирующих анализов.
• В ИФА используйте пластины, покрытые фосфопептидом, и подтвердите реактивность с контролем нефосфорилированного пептида для оценки фосфоселективности.
• Данное антитело предназначено для образцов человека; перекрестная реактивность с другими видами не сообщалась, поэтому рекомендуется валидация в соответствующей системе образцов.

CamelBio: Ваш мост для закупок полного цикла

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств и исследовательским учреждениям упрощенный доступ к реагентам для IVD, включая это антифосфо-POLR2A антитело. Наш портфель включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реактивы оптом для исследований транскрипции и эпигенетики. Для редких или индивидуальных мишеней мы предлагаем специализированную поддержку по поиску для ускорения разработки вашего анализа от концепции до клиники.